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菠菜是深受人们喜爱并在我国大面积种植的绿叶蔬菜,其根系分布较浅,再生能力弱,对盐渍化环境适应性差,一旦遭受盐害,产量和品质会受到显著影响。采用外源油菜素内酯(EBL)是缓解植物受到胁迫伤害的有效方法。本试验研究了外源EBL对Ca(NO3)2胁迫下菠菜的生长指标和生理特性的影响,为缓解菠菜Ca(NO3)2胁迫,改善菠菜生长提供技术方法和理论基础。以菠菜品种‘圆宝’为试材,设4个处理:(A)CK:1/2 Hoagland;(B)CK+EBL:1/2 Hoagland+10-7 mol·L-1 EBL;(C)CK+Ca(NO3)2:1/2 Hoagland+80 mmol·L-1Ca(NO3)2;(D)CK+Ca(NO3)2+EBL:1/2 Hoagland+80 mmol·L-1 Ca(NO3)2+10-7 mol·L-1 EBL。测定外源EBL对Ca(NO3)2胁迫下菠菜幼苗根系生长,根系离子、可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸含量和相对电解质渗透率的影响。利用双向电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)连用技术,研究外源EBL对Ca(NO3)2胁迫下菠菜幼苗根系蛋白质组的影响。结果表明,80mmol·L-1Ca(NO3)2胁迫下,菠菜根系生长受到明显抑制,根系干、鲜样质量降低,主根长减少,但侧根增多;外源EBL显著提高了Ca(NO3)2胁迫下根系的干、鲜样质量和主根根长。Ca(NO3)2胁迫下,菠菜根系Ca2+含量显著增加了105.46%,K+含量显著降低33.76%;而施加外源EBL使得Ca(NO3)2胁迫下菠菜幼苗根系Ca2+含量下降了38.65%,K+含量上升,与CK处理无显著差异。Ca(NO3)2胁迫显著增加了菠菜根系可溶性糖、脯氨酸、可溶性蛋白的含量和相对电解质渗透率,分别提高了103.52%、68.748%、35.26%、57.36%;外源EBL处理使得Ca(NO3)2胁迫下菠菜幼苗根系可溶性蛋白和可溶性糖分别下降了15.47%和16.58%,但对脯氨酸含量及相对电解质渗透率影响不显著。通过双向电泳和质谱鉴定技术联用获得96个差异表达的蛋白点,涉及代谢、能量、细胞结构、防御、转录和翻译、蛋白修饰和降解等。Ca(NO3)2胁迫下菠菜根系中氮代谢和木质素生物合成蛋白被诱导,细胞骨架和细胞壁多糖代谢被抑制;而外源EBL促进了Ca(NO3)2胁迫下菠菜幼苗根系蛋白合成和修饰、抗氧化代谢系统及木质素合成等相关蛋白的表达。综上所述,外源EBL可以通过调节根系离子和渗透物质的含量增加菠菜幼苗的Ca(NO3)2抗性,并可能与根系蛋白合成和修饰、抗氧化代谢系统和木质素合成相关。