【摘 要】
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本研究旨在建立一种可检测3 型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)的反转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。根据DHAV-3 基因的保守序列,设计一套RT-LAMP 引物,以样品的cDNA 为模板,利用Bst DNA 聚合酶,在63℃恒温条件下进行扩增,扩增产物中加入钙黄绿素和氯化锰染色直接或在紫外光下观察判定扩增结果。
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院 广西 南宁 530004
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛
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本研究旨在建立一种可检测3 型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)的反转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。根据DHAV-3 基因的保守序列,设计一套RT-LAMP 引物,以样品的cDNA 为模板,利用Bst DNA 聚合酶,在63℃恒温条件下进行扩增,扩增产物中加入钙黄绿素和氯化锰染色直接或在紫外光下观察判定扩增结果。
其他文献
为了解引起鸡产蛋骤降的坦布苏病毒全基因组分子特征,本研究运用RT-PCR 技术测定了2 株坦布苏病毒鸡源分离株全基因组序列。
禽坦布苏病毒病是新发的可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的一种疫病。本研究旨在建立一种快速诊断方法用于临床诊断及流行病学调查。根据GenBank发表的鹅坦布苏病毒JS804株全基因序列,设计了2对特异性引物,建立了禽坦布苏病毒套式RT-PCR检测方法。
某种鹅场出现母鹅产蛋率降低、脱肛,公鹅阴茎脱垂,死淘率过高,鹅胚受精率降低,孵化全程死胚率升高,孵化出的雏鹅弱雏比例升高。
利用PCR 方法扩增得到目的片段,并引入FLAG 标签序列(DYKDDDDK),构建重组表达质粒pET28a-E-I/II.转化至BL21(DE3)中,经IPTG 诱导表达目的蛋白质,并对其进行SDS-PAGE 分析和Western-blot 鉴定.
采用RT-PCR 方法扩增出了鹅坦布苏病毒的E 蛋白结构域Ⅲ,将其分别克隆至表达载体pET32a(+)和pET28a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-EⅢ和pET28a-EⅢ,转化入大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。
Since April 2010,domesticated ducks in China have been suffering from an emerging infectious disease characterized by retarded growth,high fever,loss of appetite,decline in egg production,and death.
为同时在昆虫细胞中按照合适比例表达禽腺联病毒的三个结构蛋白,首先根据禽腺联病毒VP 基因序列设计引物,扩增出VP 基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转移载体pFastBac-VP, 将其转化到DH10Bac 感受态细胞中, 经抗性和蓝白斑筛选, 获得重组穿梭质粒rBacmid-VP,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBac-VP.
Glycoprotein C is one of the duck plague virus (DPV) glycoproteins and is encoded by the DPV UL44 gene.
鸭瘟病毒(DEV)是一种α 疱疹病毒,能引起鸭、鹅、天鹅等雁形目水禽产生一种急性、热性、败血性、接触性传染病。防治该病的主要措施是定期接种鸭瘟疫苗,常用的疫苗为鸭瘟病毒减毒活疫苗。
Duck plague is an acute,contagious disease of ducks,geese,and swans that is caused by an alphaherpesvirus [duck plague virus (DPV); Anatid herpesvirus 1].