【摘 要】
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根据PRRSVVR-2332毒株核苷酸序列,设计针对GP5基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功的扩增出GP5基因,将该基因与真核表达载体pCI-neo连
【机 构】
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新疆石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832000 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春 130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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根据PRRSVVR-2332毒株核苷酸序列,设计针对GP5基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功的扩增出GP5基因,将该基因与真核表达载体pCI-neo连接,转染Marc-145细胞中,用间接免疫荧光试验、SDS-PAGE和western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果：RT-PCR分别扩增出GP5基因大小与预期一致,与国际PRRSV美洲型VR-2332毒株的GP5基因序列同源率为89.2％;间接免疫荧光、SDS-PAGE及western-blot试验证明GP5蛋白在Marc-145细胞中成功表达;同时利用pCI-neo真核表达载体在Marc-145细胞中成功表达了PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因,为下一步研究蛋白的功能奠定了基础。
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