【摘 要】
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目的:确定LNX在破骨细胞分化过程中表达水平的变化,以及沉默及过表达LNX对于破骨细胞分化和功能的影响。方法:1.采用Rankl体外诱导骨髓单核一巨噬细胞(BMMs)分化的方法生成破
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目的:确定LNX在破骨细胞分化过程中表达水平的变化,以及沉默及过表达LNX对于破骨细胞分化和功能的影响。方法:1.采用Rankl体外诱导骨髓单核一巨噬细胞(BMMs)分化的方法生成破骨细胞,检测LNX基因在诱导形成破骨细胞过程中表达水平;2.构建含LNX的shRNA的慢病毒,转染BMMs并诱导向破骨细胞分化,观察沉默LNX后对于破骨细胞分化和功能的影响,并研究LNX相关的Numb和Notch信号通路的改变。3.构建含LNX全长cDNA的逆病毒,转染BMMs并诱导向破骨细胞分化,观察过表达LNX基因后对于破骨细胞分化和功能的影响,并研究相关信号通路的改变。结果:1.随着破骨细胞的分化,LNX2表达水平明显升高,LNX1表达量较低,有显著性差异。2.沉默LNX2后,破骨细胞的分化及骨吸收功能被有效抑制。沉默LNX2会使得Numb表达水平上升,Notch信号通路表达水平明显降低,且Notch信号通路下游的Hes1水平受到抑制。3.过表达人全长LNX2后,破骨细胞的分化及骨吸收功能受到部分抑制,但是受抑制程度远低于沉默LNX2时受抑制程度。Numb蛋白表达水平有少部分上升。结论:LNX2是破骨细胞分化所必需的关键性蛋白;LNX2可能通过Numb和Notch信号通路影响了破骨细胞的分化。但可能还存在其他的机制,需要进一步的深入研究。
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