【摘 要】
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<正>目的利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达技术制备重组美伐他汀合成酶基因mlcF的蛋白,为研究该基因在美伐他汀生物合成途径中的作用奠定基础。方法利用PCR技术,以美
【机 构】
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西南大学药学院现代生物医药研究所;
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<正>目的利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达技术制备重组美伐他汀合成酶基因mlcF的蛋白,为研究该基因在美伐他汀生物合成途径中的作用奠定基础。方法利用PCR技术,以美伐他汀产生菌株基因组为模板,扩增出mlcF基因,并在基因序列3’端引入His6标签,将其克隆到表达载体pPIC9K上,线性化重组质粒后电转进P.pastoris进行同源重组,经过G418抗性梯度筛选获得高拷贝的重组菌株,甲醇诱导分泌表达,并考察其诱导最优条
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