研究目的:前期研究发现双相真菌马尔尼菲篮状菌(T. marneffei,TM)的致病性酵母相对新型抗真菌药物棘白霉素类不敏感,探讨其可能的机制有助于发现TM治疗的新靶点。研究方法:通过原生质体基因转化技术,构建细胞壁合成相关信号通路Ca2+-calcineurin、HOG-MAPK中的核心基因calcineurin A(CnaA)、calcineurin B(CnaB)、以及Hog1(SakA)、Pbs2的基因敲除株,观察敲除株在25℃,37℃下生长特性、对细胞壁合成、应激反应及致病力的影响。研究结果:与野生株相比,?cnaA、?cnaB、?sakA、?pbs1基因敲除株形态及生长特性改变、应激反应能力明显降低,细胞壁完整性遭到破坏;?cnaA、?cnaB酵母相对卡泊芬净、米卡芬净敏感性显著增高。基因敲除株抗巨噬细胞吞噬杀死能力、对小鼠致病力明显下降。研究结论:Ca2+-calcineurin、HOG-MAPK信号通路在TM形态功能、产孢能力、热应激、渗透压应激以及氧化应激中起着重要的调控作用。并且Ca2+-calcineurin、HOG-MAPK信号通路在调节细胞壁几丁质合成中发挥重要作用,酵母相TM细胞壁中几丁质含量增多是导致TM酵母相对棘白霉素敏感性较菌丝相下降的一个重要原因,提示,对几丁质的调控可作为新的药物作用靶位。同时发现,Ca2+-calcineurin、HOG-MAPK信号通路在马尔尼菲青霉侵袭感染中起重要作用。