【摘 要】
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目的 探讨P 物质与神经肽Y 对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化、凋亡等生物学效应的影响,并从经典 Wnt/β-catenin 通路角度探讨其可能的机制.方法 取 SD 大鼠第 3 代 BMSCs,根据加入刺激物不同的浓度将细胞分为4 组(n=3):SP(10-8 mol/L)组,SP(10-10 mol/L)组,SP(10-12 mol/L)组及对照组;培养1d、3d、5d、7d 后,Alamar
【出 处】
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中华医学会第十七届骨科学术会议暨第十届COA国际学术大会
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目的 探讨P 物质与神经肽Y 对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化、凋亡等生物学效应的影响,并从经典 Wnt/β-catenin 通路角度探讨其可能的机制.方法 取 SD 大鼠第 3 代 BMSCs,根据加入刺激物不同的浓度将细胞分为4 组(n=3):SP(10-8 mol/L)组,SP(10-10 mol/L)组,SP(10-12 mol/L)组及对照组;培养1d、3d、5d、7d 后,Alamar Blue 检测细胞增殖;去血清诱导12h、24h 后,MTT 检测细胞活性,DAPI 荧光染色法和Annexin V-FITC/PI 染色检测细胞凋亡率改变,western blot 检测凋亡蛋白 3 表达;成骨诱导培养7d、14d 后,采用免疫细胞化学、WesternBlot 对BMSCs 的成骨细胞诱导进行鉴定,采用 q-PCR 检测成骨相关基因表达的影响.选择SP 最佳浓度,根据加入刺激物不同分为4 组(n=3):对照组、SP 组,SP+DKK 组,SP+SP 受体拮抗剂组;采用 Western blot 法和 PCR 法检测各组细胞 β-catenin、p-GSK-3β、c-myc 及相关蛋白和基因的表达.NPY 分组及检测方法同 SP.
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