【摘 要】
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本研究利用实验室前期获得VRN2春化基因RNA干扰载体的阳性转基因种子,用pFGC5941中35s启动子和BAR基因两对特异性引物对阳性转基因株系的后代进行PCR检测并在大田中对其进行PPT涂抹筛选获得阳性单株,同时对阳性植株进行了田间性状观察.本实验的重点是通过对构建的VRN2 RNA干扰载体的转基因后代的鉴定和表型分析为VRN2基因的功能分析提供一定的理论依据,并为进一步探索春化基因的新功能奠
【机 构】
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河南农业大学农学院/国家小麦工程技术中心,河南郑州450002
【出 处】
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第十七次全国小麦栽培科学学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究利用实验室前期获得VRN2春化基因RNA干扰载体的阳性转基因种子,用pFGC5941中35s启动子和BAR基因两对特异性引物对阳性转基因株系的后代进行PCR检测并在大田中对其进行PPT涂抹筛选获得阳性单株,同时对阳性植株进行了田间性状观察.本实验的重点是通过对构建的VRN2 RNA干扰载体的转基因后代的鉴定和表型分析为VRN2基因的功能分析提供一定的理论依据,并为进一步探索春化基因的新功能奠定基础.结果表明：1.本实验对VRN2的RNA干扰载体的转基因后代进行PCR分子检测.阴性对照为非转基因小麦DNA,阳性对照为构建的表达载体质粒,结果显示多数都检测到与阳性对照一致的条带,而阴性对照未扩增出目标片段,说明外源基因己整合进入受体基因组中.检测结果中10个阳性植株的后代发生了分离,在被检测的10株系,共计213个转基因单株中,在35s启动子引物的PCR分子鉴定中有74个阳性单株,阳性植株获得率为34.7％.
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