【摘 要】
：
本文研究了在Cephodex微载体悬浮培养系统中规模化培养鲫脑组织细胞(GiCB)和鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)的工艺.结果 表明,微载体Cephodex适合GiCB细胞的贴壁培养,细胞贴壁期培养基中血清浓度为10％,微载体浓度为6g/L；细胞初始接种密度为2.5×105 cells/ml时,以转速35r/min,每静置30min搅拌2min的间歇搅拌
【机 构】
：
上海海洋大学水产与生命科学学院,上海201306;中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北武汉430223
论文部分内容阅读
本文研究了在Cephodex微载体悬浮培养系统中规模化培养鲫脑组织细胞(GiCB)和鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)的工艺.结果 表明,微载体Cephodex适合GiCB细胞的贴壁培养,细胞贴壁期培养基中血清浓度为10％,微载体浓度为6g/L；细胞初始接种密度为2.5×105 cells/ml时,以转速35r/min,每静置30min搅拌2min的间歇搅拌方式贴壁率最佳,8h后贴壁率可达90％以上；增殖期以45r/min的连续搅拌速度可获得最佳的细胞生长效能.采用优化的工艺条件,以感染复数为0.2的CyHV-2病毒接种规模化培养的GiCB细胞5d后,出现典型的细胞病变效应,病毒滴度(TCID50/ml)可达106.5.本项研究为鲫造血器官坏死症疫苗的规模化制备技术研究奠定了前期基础.
其他文献
[目的]旨在了解我国海水养殖源弧菌酰胺醇类药物耐药表型和分子机理.[方法]从前期分离的300株海水养殖源弧菌中挑选出42株对氟苯尼考低敏感的菌株,再次纯化和鉴定；测定了这些菌株对酰胺醇类药物(氯霉素和氟苯尼考)的敏感性；利用PCR扩增测序的方法检测了这些菌株的常见酰胺醇耐药基因的携带情况,包括：氯霉素素乙酰转移酶基因(cat1、cat2和cat3),外排泵基因(floR、cmlA、pexA、fex
传染性胰腺坏死病是中国养殖鲑鱼的常见疾病。在这项研究中，将虹鳟的单链抗体库(scFv)和中国传染性胰脏坏死病毒(IPNV) ChRtm213株的病毒蛋白VP2通过细菌展示技术共表达。然后通过流式细胞术(FCM)进行IPNV特异性抗体的筛选。经过三轮筛选，利用随机挑选单菌落的方法，获得了2株具有不同的荧光强度(MFI)的单链抗体克隆。将IPNV特异性的scFv抗体进行体外克隆、表达和纯化。结果 显示
本文章对的中草药进行了亚慢性毒性试验，为其在养殖应用上提供理论依据.将黑豆、当归、黄芪、板蓝根、金银花等中草药按照一定比例配制成复方中草药制剂，再按0％、1％、3％、5％的比例添加于罗非鱼商品饲料中，连续投喂30天，对中草药应用于养殖罗非鱼的安全性进行评价.结果 表明：(1)罗非鱼的增重率与中草药的添加剂量呈正相关关系；(2)三个添加剂量下，中草药对罗非鱼血清中的谷草转氨酶、谷丙转氨酶、白蛋白、总
中华鳖出血症病毒是引起中华鳖出血症的高致死性病毒。本文就该病毒引起的组织病理学特征及肝损伤的分子病理学特征进行了初步分析。解剖学特征显示该病毒引起中华鳖肝、脾、肾、肺、肠等组织均有不同程度充血；病理组织特征进一步显示肝、脾、肾、肺、肠等组织出现明显的病变。通过ITAQ技术对肝组织进行比较蛋白质组学分析，检测到252个差异蛋白；GO富集分析和KEGG通径分析初步揭示TSHSV感染中华鳖后引起病理变化
为了解我国主要对虾养殖区的白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)胶原蛋白基因(wsv001)蛋白结构变异情况,本研究以2015年13个省市发病地区采集的57份WSSV阳性样品为模板,用特异引物对目的片段进行扩增,连接转化扩增片段并进行测序分析。结果 显示,57份WSSV阳性样品中,扩增出现条带的样品共有18份,氨基酸序列比对结果显示扩增的wsv001片段所编
众多环境因素会对药物在动物机体内的代谢产生不同的影响,为探明温度及流速对恩诺沙星在虹鳟体内药物代谢的影响,以虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为试验材料,探究温度(5℃、10℃、15℃)和流速(8cm/s、16cm/s、24cm/s)对恩诺沙星在虹鳟体内吸收分布的影响.结果 表明：在5℃,10℃和15℃水温下,恩诺沙星在虹鳟血浆中的达峰时间Tm.分别为8.67h、4.78h和2.39h
2012年,我们在中国养殖场的一批患早期死亡综合征/急性肝胰腺坏死症的中国明对虾中发现了一株黄头病毒(YHV)新株型,拟命名为YHV-8.本文建立了一种实时荧光一步RT-LAMP方法,此方法可以很好的用于检测YHV-1和YHV-8.本研究基于黄头病毒基因组的一段保守序列设计了6条特异性引物.优化后的LAMP体系中,包含8mM的Mg2+和1.SmM的dNTPs,在58℃反应60分钟.这个RT-LAM
本实验建立了一种提取鱼肠道微生物DNA的新方法(CLU),此方法高效,经济且简单.CLU法与氧化锆珠破壁法(ZBC)及Qiagen试剂盒(QIA)两种方法同时提取锦鲤肠道微生物DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳及16S rDNA高通量测序进行检测及比较.在方法CLU中,将溶菌酶与超声波结合分离基因组DNA,且首次将溶菌酶的孵育温度提高到60℃.琼脂糖凝胶电泳表明CLU法和QIA法可得到单一清晰的DNA条
为获取低温冻存贝类样本中感染牡蛎疱疹病毒(Ostreid herpesvirus 1,OsHV-1)的基因组序列,分析不同年代变异株基因组序列的变异情况.我们利用基于牡蛎疱疹病毒基因组长片段PCR扩增技术建立的基因组DNA高通量测序平台,使用Illumina Hiseq 2500 PE250,对2001年栉孔扇贝感染OsHV-1变异株的基因组进行高通量测序,并分析与其他年代已知OsHV-1变异株基
用含0％、1.0％复方中草药的饲料分别投喂初始体重为23.85±0.36g的吉富罗非鱼8周后，研究复方中草药对吉富罗非鱼生长和肌肉游离氨基酸组成的影响.结果 显示：饲料中添加1％的复方中草药能明显促进吉富罗非鱼生长，实验组罗非鱼的增重率比对照组提高了29.12％；饲料中添加1％的复方中草药能显著提高罗非鱼肌肉中游离氨基酸总含量(P＜0.05)，对四种呈味氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)的