绵羊绒毛膜滋养层细胞是绵羊胎盘细胞的一部分,存在于胎盘合体滋养层,是构成胎盘屏障的主要组织结构,滋养层细胞在胚胎的植入过程中扮演重要角色,其增殖和功能调节的异常与多种胎盘发育相关疾病的发生发展密切相关.体外培养的较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞可为研究病毒与宿主的互作机制提供细胞学基础.本试验为得到较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞,材料取自妊娠中期的蒙古绵羊胎盘(含子宫)组织,将胎盘子叶组织机械剪碎成糊状,用胰蛋白酶和胶原酶两步消化法将剪碎的组织消化分散成单个细胞,然后用Percoll密度梯度离心法进行纯化培养.绵羊绒毛膜滋养层细胞是单层贴壁细胞，倒置相差显微镜观察下滋养层细胞的形态学特点，待细胞长满培养瓶表面，用胰蛋白酶将细胞从培养瓶壁上分离下来，进行传代培养。应用Percoll通过密度梯度离心法对培养的原代细胞进行纯化，重复试验，得出选用40％和60%两个梯度纯化滋养层细胞，纯化后双核及多核滋养层细胞比例高，纯度达80%以上。纯化后的滋养层细胞及培养后形态较统一，都为不规则的多角或多边形，生长呈铺展状，为典型的上皮样细胞。细胞核质之间分明，细胞界限清晰，双核及多核细胞较多，细胞融合现象明显。经传代后融合现象更加明显，且多核现象多见。细胞在经检测CCK-8标记检测，结果表明细胞生长情况良好，细胞活力强。由此表明，该分离纯化方法能分离培养得到较高纯度的绵羊多核滋养层细胞，可为后续研究人员利用该滋养层细胞进行体外研究奠定基础。