论文部分内容阅读
目的探讨DLC-1基因在人多发性骨髓瘤(MM)启动子区Cp G岛甲基化情况,以及三氧化二砷(As2O3)诱导DLC-1基因的去甲基化作用。方法采用甲基特异性PCR法(MSP)定性检测2008年至2012年来自福建医科大学附属协和医院血液内科的52例MM患者DIC基因甲基化状态,RT-PCR检测MM患者和人骨髓瘤U266细胞系DLC-1基因的表达情况;采用重亚硫酸盐测序PCR(BSP)法定量检测As2O3作用前、后人MM细胞株U266其DLC-1基因的甲基化状态,荧光定量PCR检测U266细胞用药前后DLC-1基因、DNMT1、DNMT3a、DNMT3b基因m RNA的表达变化。结果 MM患者DLC-1基因的甲基化比例为71.15%(37/52),U266细胞DLC-1基因甲基化,DLC-1基因不表达;经0.5、1.0、2.0μmol/As2O3作用后72小时后U266细胞DLC-1基因甲基化率由95.38%下降至63.07%、30.00%及7.69%;荧光定量PCR检测经0.5、1.0、2.0μmol/As2O3作用后72小时后U266细胞DLC-1基因m RNA表达与未加药组相比分别为原来的1.6±0.09、3.66±0.17、5.29±0.15倍。结论 DLC-1基因甲基化在MM患者中较为常见,这可能为MM的诊断和治疗提供借鉴;As2O3可诱导DLC-1基因去甲基化,使DLC-1基因表达上调,恢复其活性,为MM去甲基化治疗提供新思路。