植物内生菌存在于植物的果实、种子、胚、根和茎中,它通过在植株组织内占据有利生态位点、诱导抗性、抑菌作用、促生作用、固氮作用等保护寄主植物,也可作为外源基因载体导入植物体内。本实验通过对山东沾化冬枣内生菌的分离与鉴定,初步明确了冬枣微生态系中的细菌种类,为开发利用内生菌提供了菌株资源。将从山东沾化采集健康饱满的冬枣,用75%的酒精2min和2%次氯酸钠10min表面消毒,无菌水清洗五次,将冬枣组织块放入无菌水中,振荡;在牛肉膏蛋白胨培养基上划线,放入30℃培养箱中培养。依据菌落形态不同从冬枣健果内分离得到4株内生细菌,命名为B1,B2,B3,B4。提取这四株菌的总基因组,采用细菌16SrDNA的通用引物进行PCR扩增,引物63f(5’-CAG GCC TAA CAC ATG CAA GTC-3’),引物1387r(5’-GGG CGG TGTGTA CAA GGC-3’)。16SrDNA序列通过BLAST比对,初步鉴定这4株细菌均为为芽孢杆菌属(Bacillus)的细菌。将从山东沾化采集健康饱满的冬枣,取冬枣组织块用75%的酒精2min和2%次氯酸钠10min表面消毒,无菌水清洗五次,将组织块放在PDA中27℃培养箱中培养。依据菌落形态不同从冬枣健果内分离得到10株内生真菌,初步鉴定其中2株为链格孢属(Alternaria)和镰刀菌属(Fusarium)。在后续的工作中参照《伯杰氏细菌鉴定手册》对4株芽孢杆菌进行生理生化指标的测定,将其鉴定到种。参照《真菌鉴定手册》对10株真菌进行鉴定,并进一步测定内生菌对冬枣贮藏期病害的防治效果。