【摘 要】
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目的：观察RNA干扰沉默PPAR7基因对小鼠骨髓基质干细胞成脂与成骨分化潜能的影响。 方法：针对小鼠PPAR7基因，构建短发夹状siRNA真核表达载体并转染小鼠骨髓基质干细胞。逆转录
【机 构】
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武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科
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目的：观察RNA干扰沉默PPAR7基因对小鼠骨髓基质干细胞成脂与成骨分化潜能的影响。
方法：针对小鼠PPAR7基因，构建短发夹状siRNA真核表达载体并转染小鼠骨髓基质干细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹沉淀观察PPARγ的基因沉默效果。分别在成脂及成骨诱导培养基条件下，诱导培养14d，采用油红O(Oil Red O)染色及茜素红染色鉴定分化结果，并与空载体转染组和未转染组比较。
结果：测序证实成功构建PPARγ的shRNA真核表达载体pSilencer-shPPARγ，转染小鼠骨髓基质干细胞后，PPARγ基因表达显著抑制(92％)。与对照组比较，shPPARγ转染组小鼠骨髓基质干细胞的成骨分化率为56.46±1.92％，明显高于pSilencer-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01)；成脂分化率为19.24±0.98％，显著低于pSilencer-shPPAKγ-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01)。
结论：RNA干扰沉默PPARγ基因后，可增强小鼠骨髓基质干细胞的成骨分化潜能，抑制其成脂分化潜能。
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