论文部分内容阅读
目的：蛇菰具有生物活性的成分主要有:多酚鞣质类,甾醇类和黄酮类等.本文研究从日本蛇菰中分离的多酚类化合物:1,3-二-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(BJA3121)的抗细胞粘附作用;并在细胞和分子水平上,从细胞粘附趋化因子表达以及核转录因子(NF-κB)活性的变化来研究BJA3121抗细胞粘附作用的分子机理.
方法：1、采用荧光显微镜方法检测荧光素标记的人单核白血病细胞系THP-1与贴壁生长的A549细胞粘附；2、采用实时定量荧光PCR技术检测细胞因子和粘附趋化因子的mRNA表达；3、采用Western blot技术、免疫荧光技术和应用荧光显微镜直接观察TNF-α诱导的NF-κB p65核转录与TNF-α诱导的关系。
结果：1.BJA3121以20μg/ml而且处理24h后的作用强度大于6h和12h，作用呈现时间依赖性。当BJA3121以20,30和40μg/ml分别预处理A549细胞12h后，对TNF-α刺激A549肺癌细胞诱导的THP-1与A549细胞的粘附呈现剂量依赖性的抑制作用；2.TNF-α单独刺激A549细胞6h后，细胞中IL-8、IL-6基因的表达呈现显著性增加。BJA3121从10-40μg/ml的四个剂量均能抑制TNF-α诱导的A549细胞的IL-8、IL-6mRNA的高表达，且抑制作用呈剂量依赖性；3.TNF-α(25ng/ml)单独刺激A549细胞6h后，细胞中三种因子的表达均显著升高。BJA3121在20和40μg/ml的两个剂量均能抑制TNF-α诱导的A549细胞的MCP-1mRNA的过表达，抑制作用呈剂量依赖性。但BJA3121对TNF-α诱导的ICAM-1和MMP-9 mRNA的表达无抑制作用。
结论：1.多酚化合物BJA3121在体外抑制肿瘤坏死因子-α诱导的人单核白血病THP-1细胞与人肺癌A549细胞粘附；2.多酚化合物BJA3121抑制TNF-α诱导的A549细胞的细胞因子IL-8和IL-6以及粘附因子MCP-1基因的表达，但对ICAM-1和MMP-9基因的表达无影响；3.多酚化合物BJA3121通过抑制A549细胞NF-κB亚基p65磷酸化，NF-κB p65亚基从胞浆向细胞核转运以及细胞胞浆内I-κB的降解来抑制TNF-α诱导的NF-κB信号通路激活。