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为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not I酶切位点，将PcR产物克隆到pGEx-6P-1载体，构建的重组质粒命名为pGEx-TTV1-ORF1-c1。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后进行诱导表达，获得了含GST标签的PTTv1-rCap重组融合蛋白，经SDS-AGE电泳分析和western blOt鉴定，目的蛋白获得了高效表达，分子量约为64．0kDa，以包涵体形式存在。用纯化的重组蛋白免疫Balb／c小鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术获得了8株稳定分泌抗PTTv1rCap蛋白的杂交瘤细胞株，依次命名为1H4、1E9、1E11、4G12、5c5、788、8c2、8G2，MAb亚类鉴定均为IgG1，轻链为K型；MAb培养上清效价为400～3200倍，腹水为4．0×105～6．4×1 06倍；有7株单抗与PTTVl=Cap蛋白产生特异性反应，另1株MAb(1E11)呈阴性，可能针对构象表位。为验证8株单抗与真核表达的cap蛋白的免疫反应性，将全长与截短的PTTV1-0RF-基因片段克隆到pcDNA3-1/V5-His TOPO表达载体，转染293T细胞进行蛋白表达，采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测表明，这8株MAb均能够与表达的c印蛋白产生特异性反应。本研究表达的PTTV1-Cap蛋白及制备的MAb，为该病毒诊断方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础。