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我国是茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)的原产地,茶树种质资源极其丰富、多样,这为茶叶生产和茶树良种选育提供了良好的物质条件。本研究选用本实验室收集、选育的50份来自福州茶树种质资源圃和诏安茶树种质资源圃的高儿茶素茶树种质作为试验材料,利用RAPD分子标记技术对其进行遗传多样性分析和聚类分析,根据6条随机引物的特异扩增或缺失条带鉴定了 32份茶树种质,最后分析5份高儿茶素含量和2份低儿茶素含量茶树种质的特异条带,克隆出一条可能与儿茶素合成相关的Nad1基因的DNA片段。主要试验结果如下:1.对传统的CTAB法进行优化,建立了一种简便、高效的茶树基因组DNA提取和纯化方法。经检测,该方法提取的DNA纯度高,其OD260/OD280值均在1.80～2.00之间。2.通过优化DNA模板用量、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量5个主要影响PCR反应的因子和退火温度梯度试验,摸索了 一套适合本试验研究的RAPD-PCR最佳扩增反应体系和程序,所得到的PCR扩增产物电泳条带清晰、重复性好。3.从60条随机扩增引物中筛选出扩增条带清晰、重复性好的23条,共扩增出214个位点,其中,有183个多态性位点,占85.51%,平均每条引物扩增9.3个位点,引物扩增位点数最多的有13个,最少的有6个;共扩增出7312条谱带,平均每份茶树种质扩增出146.24条谱带。4.用软件POPGENE v1.32对50份茶树种质资源进行遗传多样性分析,结果显示,全部样品之间的Nei’s(1973)遗传多样性H=0.2694,Shannon’s信息指数I=0.4088,Nei’s(1978)遗传距离从 0.0236(样品 38 和 39)到 0.6038(样品 18 和31),遗传相似度从0.5467(样品18和31)到0.9766(样品38和39),说明参试的50份茶树种质资源的遗传多样性很丰富,而且亲缘关系变异大。5.用软件NTSYSpc v2.10e对50份茶树种质资源进行亲缘关系的UPGMA聚类分析,结果显示,当以遗传相似度为0.74左右来划分时,50份茶树样品聚类为2个复合组和1个独立组,第一组只有样品31;第二组包括样品37～50;其余35份样品归为第三组。当以遗传相似度为0.76左右来划分时,50份茶树样品聚类为4个复合组和2个独立组,第一组包括样品:40、42～50;第二组包括样品:37～39、41;第三组包括样品:13～24;第四组包括样品:1～12、25～30、32～35;样品16和31各自独立成为一组。6.将参试的50份茶树种质资源根据不同随机引物RAPD扩增产物电泳条带的“有”和“无”按不同品系进行分子鉴定,其中,32份茶树样品可以进行区分,包括A1系列(样品1、2、17)、A2系列(样品3～9)、A3系列(样品10、11)、B1系列(样品12～16、18)、DC系列(样品31、38、39)、BX系列(样品34、40)、RG系列(样品42～46)、TTX系列(样品47、48)、MLX系列(样品49、50)。7.通过分析5份儿茶素含量最高和2份儿茶素含量最低的茶树种质的特异条带,获得一条特异片段,经回收、克隆及测序,其长度为414bp,NCBI同源性比对结果显示,该片段与Couepiaguianensis、Licania alba、Licaniasprucei等植物中的NADH脱氢酶亚基1(Nadl 基因的部分核苷酸序列同源性较高,均达80%以上。初步推测,茶树中的Nadl基因可能参与了调控儿茶素的合成。