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目的：随着ER基因被成功克隆，人们对ERα的结构及ERα介导的基因转录机制的研究取得了显著进展。近年来人们又在小鼠及人类组织中发现了另一类雌激素受体β，但ERβ究竟在乳腺癌的形成和发展中起着什么作用，它在乳腺癌的功能如何?与其他临床病理生物学特性指标的关系，如血管生成因子之一的碱性纤维母细胞生长因子（Basic Fibroblast Growth Factor，bFGF），以及对乳腺癌生存率的影响?迄今还鲜有文献报道。本研究通过基因转染技术研究其功能，并研究ERβ和bFGF在乳腺癌组织中的表达，探讨其检测的临床价值和对乳腺癌生存率的影响。 方法：采用脂质体（lipofectin）转染法将ERβ表达质粒转染入缺乏ERβ基因表达的MDA-MB-435细胞株中，通过10μg／ml浓度嘌柔霉素连续作用，筛选出抗嘌柔霉素的细胞克隆，经RT-PCR和Western Blot法证实其含有ERβ。同时利用流式细胞仪分析，进行ERβ质粒和空载体转染细胞的细胞周期分析、以及细胞周期相关蛋白D1（cyclin D1）和细胞周期蛋白E（cyclin E）和p21WAF1／CIP1的检测。 乳腺癌新鲜手术标本86例。采用免疫组织化学法检测ERα蛋白水平；采用Western Blot方法检测ERβ和bFGF蛋白表达。ERβ蛋白和b-FGF蛋白的Western Blot的定量采用图象分析仪。ERβ蛋白的定量，采用了睾丸组织作为阳性对照，如果乳腺癌标本的ERβ蛋白量为阳性对照的50％以上，则定义为高表达，如为阳性对照的50％以下，则定义为低表达。同样bFGF蛋白的定量，以胎肝组织为阳性对照，如果乳腺癌标本的bFGF蛋白量为阳性对照的50％以上，则定义为高表达，如为阳性对照的50％以下，则定义为低表达。采用Chi-square test进行显著性差异的统计学分析；采用Kaplan-Meier方法进行生存率分析；采用Cox回归法进行预后指标的多因素分析。采用的统计学软件是SPSS10.0。硕士研究生学位论文 中文摘要结果：一、（X我们采用质粒转染法将 E叩表达质粒转染至 MDAMB、％细胞中，经瞟柔霉素的筛选，筛选出抗膘柔霉素的细胞克隆，经 RT－PCR和 ResternBlot证实，该克隆己高表达ER 9的mRNA和蛋白。（2）【叩高表达的MDA－MB－435细胞，和对照细胞相比，其细胞倍增时间明显加快，uR p高表达的mAMB叫而细胞：17小时；对照细胞：32小时）6期细胞明显上升u叩高表达的MDA仇BA35细胞：56％；对照细胞：43％人GI期细胞下降【R6高表达的MDA喇B人“细胞：18．3％：对照细胞：犯．9％)。门)。我们利用伽s乙ernBI叮法检测了细胞周期相关蛋白的变化，发现在转染株中细胞周期蛋白DI和细胞周期蛋白E的表达量明显增加，而P21’‘”‘””的表达量明显降低。 二、在86例乳腺癌中，59例（6S．5％）的标本呈ER 0低表达，27例（31．5％）呈皿fi高表达。46例（53．4％）呈bFGF高表达，40例（46．6％）呈bFGF低表达。ER 6表达水平和 ER。及 PR表达水平无关（P＞0．05）。bFGF蛋白表达和 ER a及ER 6表达有显著意义：ER Q低表达、ER 6高表达者，bFGF表达水平较高；ERa高表达、ER P低表达者，则bFGF表达水平相对较低。低表达ER 5的乳腺癌患者无论是无瘤生存还是总生存率都要较高表达ER D的乳腺癌患者要好；同时我们还发现低表达bFGF的乳腺癌患者无论是无瘤生存还是总生存率也都要较高表达bFGF的乳腺癌患者要好。还并且进一步证实高表达ERa的乳腺癌患者无论是无瘤生存还是总生存率都要较低表达ERa的乳腺癌患者要好。对不同ER日和bFGF表达亚型对乳腺癌预后的影响进行分析，发现ER P和bFGF同时高表达的乳腺癌患者的预后最差。结论：l、ER6在乳腺癌细胞中的功能和 ERa不同，具有刺激细胞生长的作用。2、ER 6和 bFGF在乳腺癌中的表达，对乳腺癌的预后起有非常重要的作用。