针对视神经遭受各种损伤后视网膜层面发生的相关变化及其机制,以及有关视神经保护、再生等方面的研究,已有较多的报道。但对于各类视神经损伤后,中枢视觉通路靶神经元的变化目前所知较少。本课题从中枢视觉系统着手,通过建立大鼠视神经钳夹伤模型和猕猴慢性高眼压性青光眼模型,研究在视神经损伤后不同阶段,外侧膝状体的变化特点与机制,以期对视神经损伤后视觉通路的变化与转归过程有更深的了解,为进一步的视觉功能修复或重建提供相关的研究基础。 第一部分 大鼠视神经夹伤后外侧膝状体神经元的早期变化 采用70g压力的显微无创血管钳夹持SD雄性大鼠右侧视神经30s,分别于损伤后2h、1d、3d、7d和14d,采用免疫组化和Western blot法检测大鼠外侧膝状体和视网膜中的c-Jun和c-Fos的蛋白定位及表达量,进而用特异性神经元标记抗体NeuN或calbindin D-28k在外侧膝状体行荧光双标,在视网膜用c-Jun、NeuN抗体与荧光核酸染料TOTO-3行荧光三标。 实验结果显示,在大鼠右眼视神经钳夹伤后,损伤眼的视网膜神经节细胞层的NeuN阳性细胞数量在损伤后7d出现减少,14d时减少达49%。损伤眼视网膜未见c-Fos阳性细胞。c-Jun阳性细胞仅出现在视网膜神经节细胞层NeuN阳性细胞的胞核中,在2h时已出现,3d时最多,7d时减少,14d时仍有少量。 双侧外侧膝状体NeuN阳性细胞密度在损伤后各时间点未观察到明显减少。损伤眼同侧的外侧膝状体腹侧核内侧核团和中间核可见c-fos阳性细胞,损伤后2h开始出现,1d时达到高峰,7d时明显减少,14d仍有少量。外侧膝状体的背侧核及对照组未见c-Fos阳性细胞。Calbindin D-28k阳性细胞主要出现在外侧膝状体的腹侧核内侧核团和中间核内。75%～83%的c-Fos都出现在calbindin D-28k阳性细胞的胞核中。在损伤眼双侧的外侧膝状体的三个核团均见c-Jun阳性细胞,表达规律与c-Fos相似。C-Jun/NeuN双标细胞占c-Jun阳性细胞的比例在损伤后各时间点均大于90%。 本部分的研究发现大鼠视神经钳夹伤诱导了即早基因c-Fos和c-Jun在外侧膝状体和视网膜神经元中的表达,钙结合蛋白Calbindin D-28k参与了伤害性刺