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目的本实验运用联合顺次法(关节冲洗,透明质酸注射,中药离子导入)治疗实验兔膝关节骨性关节炎,通过检测实验兔右股骨内髁软骨中bFGF表达以及对软骨的组织形态学观察,探讨其治疗膝骨性关节炎的机理。为临床上运用膝关节冲洗,关节腔内透明质酸注射,中药离子导入联合顺次治疗膝骨性关节炎提供理论和实验依据。方法本研究选取70只体重为2500g(±100g)健康成年日本大耳白兔,雌雄不分,随机分成7组,分为正常组(Ⅰ)、模型组(Ⅱ)、关节冲洗组(Ⅲ)、透明质酸注射组(Ⅳ)、中药离子导入组(Ⅴ)、骨友灵擦剂组(Ⅵ))、联合顺次组(Ⅶ),每组10只。除正常组外,余组采用结扎右侧股静脉致骨内高压的方式造模。造模8周后,正常组及模型组不做任何特殊处理,余组以相应的方法处理或治疗。治疗5周后,将实验动物处死,解剖膝关节,肉眼观察实验兔关节软骨表面情况,切取部分右股骨内髁软骨,用免疫组化法检测软骨中bFGF的表达,并对软骨进行透射电镜观察并摄像。结果1.关节软骨bFGF表达各治疗组关节软骨bFGF表达与正常组、造模组比较均有明显增高(p<0.01),其中联合顺次组最明显,与其他治疗对照组比较有显著差异(p<0.05)。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组间比较无显著差异(p>0.05)2.肉眼及电镜下观察肉眼下观察：肉眼下Ⅰ组膝关节软骨未见明显异常变化,关节面光整,色泽正常；Ⅱ组关节软骨改变最明显,其关节面变黄、糜烂,缺损深达软骨中层或关节面溃疡形成,缺损深达软骨深层。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组关节面粗糙,有小的裂隙且色泽灰暗。联合顺次组表层软骨破坏比模型组明显减轻。镜下观察：Ⅰ组见软骨细胞形态正常,细胞核完整,核膜清晰,核内染色质均匀分布；Ⅱ组可见凋亡细胞,细胞高度固缩,染色质浓聚,染色深,核仁消失,胞质内细胞器减少甚至消失,胞膜下可见空泡；Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组可见核不规则,基质尚匀称,染色浅,部分内质网轻度扩大；Ⅶ组联合顺次法组见软骨细胞核呈椭圆形,细胞及胞膜完整,细胞核完整、胞质内有丰富的细胞器。通过肉眼及电镜下观察联合顺次组与其他治疗组相比能较好改善兔膝关节软骨的破坏。结论联合顺次法对实验兔膝骨关节炎软骨改善有很好的效果,且联合顺次法对软骨的改善作用优于对照组治疗方法。实验结果表明联合顺次法与其他治疗组相比能上调bFGF表达,较好修复兔膝骨性关节炎关节软骨,改善破坏的关节软骨,延缓关节软骨的退变。联合顺次法为临床膝关节冲洗、关节腔内透明质酸注射、中药离子导入治疗膝骨性关节炎提供理论和实验依据。