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食品中农兽药残留一直是人们关注的焦点,我国农业部也制定了相应的规章制度来限制农兽药的使用。然而,仍有不法分子违规使用农兽药,导致农兽药在食品中的残留问题严重。目前,农兽药残留检测主要依靠传统的仪器分析方法,这些仪器检测方法虽然灵敏度和准确度高,但普遍存在检耗时、检测成本高等缺点,无法满足市场大量样本检测的需求。因此,建立一种快速、准确且适宜现场大量样本检测的分析方法极为必要。本文以氟虫腈（FIP）、甲苯咪唑（MBZ）和硫丹（END）三种物质为研究对象,以制备的高灵敏度单克隆抗体为基础,建立相对应的间接竞争酶联免疫法（ic-ELISA）和胶体金免疫层析试纸条,并应用于实际样本的检测。主要研究内容和结果如下:1.设计并成功合成FIP、MBZ和END的完全抗原,将免疫原免疫小鼠,通过ic-ELISA法对小鼠的血清进行检测,选择效价高、对待测物抑制率高的小鼠进行细胞融合,制备腹水获得相应的单克隆抗体。FIP、MBZ和END抗体的亲和常数分别是4.12×1010、2.52×1010和3.80×109 L/mol,亚型分别是IgG1、IgG2a和IgG1,轻链分别是Kappa、Kappa和Lambda。2.对ic-ELISA的标准品稀释液进行优化,在最优的条件下建立标准曲线。FIP抗体的IC50为0.43 ng/mL,对氟甲腈（FIPCF3）、氟虫腈亚砜（FIPSO）和氟虫腈砜（FIPSO2）有良好的交叉反应,其IC50分别是0.38、0.58和0.66 ng/mL,可同时检测FIP及其三种代谢物。MBZ抗体的IC50为0.16 ng/mL,对阿苯达唑（ABZ）、氟苯咪唑（FLU）和芬苯达唑有（FBZ）有交叉反应,其IC50分别为0.44、0.11和0.61 ng/mL,可同时检测上述4种苯并咪唑类药物。END抗体对END的特异性较强,对硫丹（END）、α-硫丹（α-END）和β-硫丹（β-END）的IC50分别为5.16、4.95和6.65 ng/mL。基于相对应的单克隆抗体建立ic-ELISA法,并应用于实际样本的检测。回收率均在83.46%118.92%之间,表明该方法准确度较高,具有可行性。3.基于单克隆抗体,制备相对应的胶体金免疫层析试纸条,并分别应用于鸡蛋、鲤鱼和梨的检测。鸡蛋中FIP、FIPSO2、FIPSO和FIPCF3的检测限分别为10、10、10和5 ng/g。鲤鱼中MBZ、ABZ、FLU和FBZ的检测限分别是2、4、1和10 ng/g。梨中END、α-END和β-END的检测限皆为40 ng/g。上述制备的三种胶体金试纸条均满足市场的检测需求。