背景和目的胃癌（gastric carcinoma，GC）是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率居所有癌症新发病例的第四位，死亡率居癌症相关死亡的第二位。胃癌的发生是一个多基因参与、外部因素促进的多阶段的复杂过程，主要涉及遗传学和表观遗传学两个方面，把两者结合起来研究，为更好地阐明恶性肿瘤的进展提供了新的思路。其中DNA甲基化是表观遗传学研究最深入的一种形式。启动子区CpG岛高甲基化导致的抑癌基因沉默被认为是肿瘤抑制基因失活的重要机制之一，在胃癌的发生过程中起重要作用。p53是广泛存在的抑癌基因，其突变在肿瘤的发生、发展中起重要作用。p73基因是p53基因家族中的新成员，与p53基因具有高度的同源性。p73基因在不同的启动子调控下能编码两种具有相反功能的蛋白：TAp73和ΔNp73。全长的TA-p73异构体可以诱导细胞凋亡，具有和p53基因相似的功能，被认为是候选的抑癌基因，在肿瘤发生和细胞凋亡中的作用成为当前研究的热点。而截短的ΔNp73异构体由于缺少转录激活区域，可以对抗p53诱导凋亡的作用，与p53基因具有相反的生物学功能。研究表明，p73基因甲基化与神经胶质瘤、多发性骨髓瘤和结肠癌等有关，在胃癌中关于p73甲基化的研究很少。HOX基因是一种转录调节因子，在胚胎发育和细胞分化中起重要作用，还参与了多种恶性肿瘤的发生和发展。研究发现，p53基因的启动子区有HOX基因通用序列的结合位点，因此HOX基因可以调节p53的表达，HOX编码的蛋白可以增强抑癌基因p53的功能。HOXA11基因是HOXA家族中的一员，在生殖系统肿瘤中普遍存在HOXA11基因高甲基化和低表达的现象。研究发现，HOXA11可能通过上调p73基因的表达，抑制肿瘤的发生。本研究检测了p73和HOXA11基因在胃癌组织、癌旁组织和正常对照组织中的甲基化情况及表达水平，初步分析p73和HOXA11基因甲基化水平对其基因表达的影响，进一步探讨p73和HOXA11基因异常甲基化在胃癌发生、发展中的作用。材料和方法收集河南大学淮河医院2012年05月至2013年03月之间胃癌手术切除标本32例，每例标本分别取癌组织和相应的癌旁组织（距癌组织＞5cm），所取组织离体后立即一分为二，一份置于-80℃冰箱中保存备用，另一份以10%甲醛溶液固定，制作常规病理切片，HE染色，确定病理诊断。所有胃癌患者术前均未行放、化疗和其他治疗，组织学类型均为腺癌，其中男性20例，女性12例，年龄36～85〔平均（63.4±12.1）〕岁。正常对照组织10例，均为浅表性胃炎患者。所有组织获取均征得患者、家属及本单位知情同意。用亚硫酸氢盐测序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）检测p73和HOXA11基因的甲基化水平。用Trizol（Takara公司）法提取组织总RNA，紫外可见分光光度计检测提取RNA的质量和浓度；按照北京康为世纪公司的逆转录试剂盒说明书操作步骤合成cDNA；采用荧光定量PCR（RT-PCR）方法检测p73和HOXA11基因mRNA的表达水平。采用免疫组织化学方法（Immunohistochemistry，IHC）和蛋白印迹法（western blot）分别检测胃癌组织中p73和HOXA11基因蛋白的表达水平。分析p73和HOXA11基因甲基化与胃癌临床病理因素的相关性。数据经SPSS17.0进行统计学处理，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果1、胃癌组织和癌旁组织中p73和HOXA11基因的启动子区甲基化水平均高于正常胃粘膜组织（P＜0.05），胃癌组织和癌旁组织之间的甲基化水平差异无统计学意义（P＞0.05）。TNM III期和IV期胃癌患者中p73和HOXA11基因的甲基化水平高于TNMI和Ⅱ期的患者（P＜0.05）。2、TAp73mRNA在胃癌组织的相对表达量较正常胃粘膜组织降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。ΔNp73mRNA在胃癌组织的相对表达量较正常胃粘膜组织升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。HOXA11基因mRNA在胃癌组织中的表达量低于正常胃粘膜组织，差异具有统计学意义（P＜0.05）。3、免疫组化结果显示，TAp73蛋白在胃癌组织中的表达低于正常胃粘膜组织，ΔNp73蛋白在胃癌组织中的表达高于正常组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。HOXA11蛋白在胃癌组织表达和正常胃粘膜组织相比降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。4、免疫印迹结果显示，TAp73蛋白在胃癌组织中的表达低于正常胃粘膜组织（P＜0.05）。胃癌组织和正常胃粘膜组织中ΔNp73蛋白表达差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论1、p73和HOXA11基因启动子区的高甲基化可能与胃癌的发生和发展有关。2、在胃癌组织中，TAp73和HOXA11基因mRNA和蛋白表达下调。3、在胃癌组织中，TAp73和HOXA11基因表达下调可能是该基因启动子区的高甲基化所致。