肿瘤靶向的长余辉和磁共振双模态探针的构建与活体成像分析研究

来源 :南京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liu_kun
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在活体成像研究中,开发灵敏度高、特异性强、成像效果优异的分子影像探针对癌症等疾病的诊断与监测具有重要意义。近年来,人们已经报道了多种类型的分子影像探针用于生物成像领域,不同模态的分子影像探针在进行成像应用时,各有优缺点,其中长余辉成像探针具备高灵敏度、高信噪比,但是空间分辨率差的特点,而磁共振成像探针具备高空间分辨率但是灵敏度低的特性。为了提升成像精准度,人们将两种成像模式结合起来,构建了长余辉/磁共振双模态探针,但已经开发出来的长余辉/磁共振双模态探针在应用于活体肿瘤成像时仍存在如下问题:(1)缺乏对肿瘤细胞及组织的靶向性,(2)探针多使用掺杂重金属元素的无机长余辉材料,制备条件苛刻,并且有潜在生物毒性。目前同时具备良好生物相容性、高灵敏度、高信噪比、高空间分辨率以及肿瘤靶向性的长余辉/磁共振(MRI)双模态成像探针还没有被报道过。因此,我们选取有机长余辉发光体系与磁共振造影剂,构建了双模态探针,同时,由于c RGD靶向基团能与MKN45肿瘤细胞表面过表达的αvβ3整合素特异性结合,我们在探针表面修饰上靶向基团c RGD,以此来实现探针对肿瘤组织的主动靶向,进而获取更强的成像信号。本论文由以下两部分构成:第一章为绪论,我们简要介绍了分子影像学、不同模态分子成像探针研究进展和多模态探针三方面的基本内容。第一部分围绕分子影像学的概念以及常见的各种类别的分子影像探针进行展开。第二部分主要介绍了长余辉成像探针以及磁共振成像探针的研究现状。第三部分主要针对目前已经报道的长余辉/磁共振双模态分子成像探针及其成像应用展开了介绍。在第二章中,我们通过纳米沉淀法将长余辉发光体系(MEH-PPV与NIR 775)包裹在纳米粒子中,并且在其表面连接磁共振造影剂DTPA-BSA(Gd),修饰上靶向基团c RGD,构建了长余辉和磁共振双模态成像探针NPs-RGD,应用于小鼠肿瘤的特异性成像研究。一系列的实验结果表明,探针NPs-RGD具备较高的r1弛豫率(15.2 m M-1s-1),并且在被808-nm激光照射后,能发出在780 nm左右的长余辉信号。细胞实验结果显示,得益于靶向基团c RGD与MKN45肿瘤细胞表面过表达的αvβ3整合素的特异性结合作用,探针NPs-RGD可选择性地在MKN45肿瘤细胞内蓄积,从而能够用于区分肿瘤细胞与正常细胞。我们还在细胞层面上验证了,荧光、长余辉、磁共振三种成像模态具有不同的检测灵敏度,长余辉信号最灵敏(检测限:50个/μL),磁共振信号灵敏度最差。探针NPs-RGD还可以在αvβ3整合素介导下在MKN45肿瘤中积累,对活体肿瘤进行无损伤的成像。本研究表明,利用纳米沉淀法构建的具有长余辉和磁共振双模态成像功能的分子影像探针NPs-RGD,能够在保证良好生物相容性的同时,有效地实现高灵敏度、高信噪比、高空间分辨率的肿瘤成像分析。
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