【摘 要】
：
目的:探究 miR-135b-5p 在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）增殖和迁移中的作用及机制。方法:应用基因表达数据库（Gene Expression Omnibus database,GEO）分析NPC组织和正常鼻咽上皮组织中miR-135b-5p的表达差异,使用靶基因预测数据库（Target Scan、miRDB和ENCORI）预测其靶基因,使用维恩图进行靶
论文部分内容阅读
目的:探究 miR-135b-5p 在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）增殖和迁移中的作用及机制。方法:应用基因表达数据库（Gene Expression Omnibus database,GEO）分析NPC组织和正常鼻咽上皮组织中miR-135b-5p的表达差异,使用靶基因预测数据库（Target Scan、miRDB和ENCORI）预测其靶基因,使用维恩图进行靶基因筛选,应用GEO数据库分析 miR-135b-5p 的预测靶基因 MEF2C（myocyteenhancerfactor2C）在 NPC组织和正常鼻咽上皮组织中的表达差异。使用实时定量PCR（RT-qPCR）验证miR-135b-5p 及 MEF2C 在 NPC 细胞系（NPC/HK1,C666-1,CNE-2 和 5-8F）和正常鼻咽上皮细胞系（NP69）内的表达水平。转染miR-135b-5p的模拟物（mimics）和抑制剂（inhibitor）以构建过表达和表达抑制模型。使用蛋白质免疫印迹法（Western Blot,WB）及双荧光素酶报告基因实验验证二者的靶向结合关系。使用CCK-8实验、克隆集落形成实验观察miR-135b-5p表达量变化对NPC细胞系增殖能力的影响,划痕实验和Transwell实验观察miR-135b-5p表达量变化对NPC细胞系迁移能力的影响,共转染miR-135b-5p inhibitor和MEF2C敲减质粒以构建Rescue拯救实验,验证二者在NPC增殖和迁移情况中的直接靶向调控关系。所有数据使用SPSS 26进行统计学分析,并用GraphPad Prism 8.0.2进行绘图,设定p＜0.05为差异有统计学意义。结果:使用GEO数据库分析发现,相比于正常鼻咽组织,miR-135b-5p在NPC组织中显著高表达（p＜0.05）,通过Target Scan、miRDB和ENCORI三个miRNA靶基因预测数据库预测并用维恩图筛选出MEF2C有miR-135b-5p结合的靶位点,在GEO数据库分析发现,相比于正常鼻咽组织,MEF2C在NPC组织中显著低表达（p＜0.05）,差异均有统计学意义。RT-qPCR实验显示,相比于正常鼻咽上皮细胞NP69,miR-135b-5p在NPC细胞中显著高表达（p＜0.05）,MEF2C在NPC细胞中显著低表达（p＜0.05）,差异均有统计学意义。WB实验显示,MEF2C的表达量可因过表达miR-135b-5p而受到抑制。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-135b-5p可直接靶向结合MEF2C 3’端非编码区（3’UTR）（p＜0.05）。CCK-8实验、克隆集落形成实验共同显示,过表达miR-135b-5p可促进NPC细胞增殖（p＜0.05）,下调miR-135b-5p表达可抑制NPC细胞增殖（p＜0.05）;划痕实验和Transwell实验共同显示,过表达miR-135b-5p可促进NPC细胞迁移（p＜0.05）,下调miR-135b-5p表达可抑制NPC细胞迁移（p＜0.05）。Rescue 拯救实验显示,共转染 miR-135b-5p inhibitor 和 sh-MEF2C后,sh-MEF2C能逆转miR-135b-5p inhibitor对NPC细胞增殖和迁移的抑制作用（p＜0.05）。结论:miR-135b-5p高表达与NPC增殖和迁移相关;miR-135b-5p可靶向下调MEF2C的表达,促进NPC细胞增殖和迁移;miR-135b-5p/MEF2C在NPC中发挥重要生物学功能,有望作为一种新的诊疗标志物与靶点。
其他文献
词汇作为语言系统中既基础又核心的要素之一,一直以来都是学界非常关注和重视的层面,对词汇理论的探索和研究更是经久不息,迄今为止仍热度不减。汉语词汇在历时发展的动态过程中呈现出从单音节词向双音节化演变的趋势,这是汉语词汇发展的内部规律,也已成为学界的普遍共识,因而无论是在对汉语词汇的本体研究中还是在汉语作为第二语言的教学中,对双音节词的探讨在很长一段时间内都占据着主导地位。然而,在现代汉语词汇的共时平
目的:骨关节炎（osteoarthritis,OA）是老年人群中最常见的慢性关节疾病之一。传统上,骨关节炎的诊断基于疾病的临床症状和放射学检查结果。然而,这两种方法对早期骨关节炎的诊断缺乏敏感性。本研究旨在寻找与免疫浸润相关的骨关节炎的诊断基因,为骨关节炎的早期诊断和治疗策略提供新的线索和思路。方法:我们从基因表达综合数据库（Gene Expression Omnibus,GEO）中下载了编号为G
汉语国际教育硕士专业旨在培养高素质汉语教学人才,具有很强的实践性特点。实习是汉语国际教育硕士培养环节中的重要一环,是理论知识转换为教学实践的关键步骤,也是由学生转变为汉语教师的过渡阶段。《全日制汉语国际教育硕士专业学位研究生指导性培养方案》（2009）中规定汉语国际教育专业硕士研究生实习共6学分,所以,实习对于汉语国际教育硕士生尤为重要。西安在一带一路建设中占有重要的地位,目前,我国与丝绸之路沿线
诉讼代理的形式由民事诉讼的功能定位决定。审级职能定位改革后，民事诉讼各审级的功能定位将发生转变，诉讼代理形式也应随之变化，我国法律服务市场的结构变动为此提供了条件。应适时重构我国委托诉讼代理制度，区分审级与法院层级以采用不同代理形式，初审保留公民代理，上诉审与再审采用职业代理，由最高人民法院审理的案件实行强制律师代理，并采用法官指定代理作为制度补充。
目的:对比两种不同入路与重建方法的近端胃切除术治疗SiewertⅡ、Ⅲ型食管胃结合部腺癌（adenocarcinoma of esophagogastric junction,AEG）的安全性与临床疗效。方法:收集我院2019年1月至2021年12月期间收住于胃肠外科与胸外科,分别行腹腔镜下根治性近端胃切除+胃食管肌瓣成形术（经腹肌瓣组）及左开胸近端胃切除+食管胃圆形吻合术（经胸圆吻组）治疗的Si
自20世纪70年代以来,语言学家们试图从逻辑的角度来解释语言形式及其意义之间的关系,辖域的提出就是为了试图解决自然语言中的语义难题。而其中量化词、否定词等特定表达式共用产生的辖域统制范围不同,继而造成的辖域歧义现象更是形式句法学、逻辑语义学派研究的重点。事实上,辖域、辖域歧义以及辖域解读问题不仅是汉语语言本体研究的重点,同样也能够帮助教师在国际汉语教学过程中理解二语习得者的解读错误,更好地分析、预
泛义动词是一类特殊的动词,它们语义宽泛,适用范围广,在不同的语境中可以替代许多不同的具体动词。“弄”就是最常见、使用频率最高的泛义动词之一。对于汉语作为第二语言的学习者而言,这种特性使得泛义动词“弄”的习得成为一个重点和难点。前人对泛义动词的研究多是基于书面语语料库,很少基于口语语料库进行研究;且进行定性分析的较多,将定量与定性结合的较少。另外,很多学者针对泛义动词“弄”的偏误进行原因分析并提出教
目的:探讨 C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）/白蛋白（Albumin,ALB）比值（C-reactive protein to albumin ratio,CAR）与腹膜透析（Peritoneal dialysis,PD）患者全因死亡和心脑血管死亡的相关性。方法:收集2010年1月-2019年12月苏州大学附属第二医院腹膜透析中心791名PD患者的临床资料,按照入选患者
我国目前颁布的留学生培养方案都对中高级留学生的汉语报刊学习做出了明确规定,指出该阶段的留学生对中国文化有—定的、或者更深的理解,能够听懂、看懂、读懂一定话题条件下的新闻报刊杂志等文章,能流利地运用汉语进行一定的话题交流。在这样的情况和要求下,汉语报刊阅读课逐渐蓬勃发展,留学生对这门课的学习热情也逐渐高涨。自课程设置以来,对汉语报刊阅读教材的研究也日趋完善,历代研究者都提出报刊阅读教材存在的问题并提
在全球化不断发展的浪潮中,中国的综合国力日益崛起,使得汉语在全世界范围内推广开来,海外华文教育也受到广大关注。因此当新加坡意识到随着时代的发展华文教材呈现出明显不足时,教育部会成立母语检讨委员会来检讨旧教材的不足,并提出新教材编写应遵循的课程标准。根据2004年的母语检讨委员会报告书,2007年新加坡推出07版小学华文教材《小学华文》,随着时代的发展,这版教材在结构及课文、文化等内容方面显现出很多