【摘 要】
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铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种临床常见的条件致病菌,囊性纤维症等免疫功能缺陷的患者易受感染。其临床感染患者,常分离到las R突变体。由于Las R调控包括蛋白酶等一系列胞外公共物质的生产,las R突变体剥削利用群体菌落中的公共物质来维持自身生长而获得生长优势,社会微生物学研究将该突变体视为典型的社会欺骗者。铁是铜绿假单胞菌生长过程中不可或缺的微量元素之一,参
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铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种临床常见的条件致病菌,囊性纤维症等免疫功能缺陷的患者易受感染。其临床感染患者,常分离到las R突变体。由于Las R调控包括蛋白酶等一系列胞外公共物质的生产,las R突变体剥削利用群体菌落中的公共物质来维持自身生长而获得生长优势,社会微生物学研究将该突变体视为典型的社会欺骗者。铁是铜绿假单胞菌生长过程中不可或缺的微量元素之一,参与多项代谢催化过程,且与病原菌的毒力、生物膜的形成等密切相关,对于微生物的生长和致病性至关重要。铜绿假单胞菌的感染常导致患者体内的铁离子浓度显著升高。高浓度铁离子环境下对铜绿假单胞菌的社会微生物学行为产生的影响,目前尚无报道。针对此问题,我们进行了不同铁离子浓度对铜绿假单胞菌社会进化影响的研究,尤其注重研究铁离子浓度对菌落群体产生社会欺骗者的影响。本研究通过铜绿假单胞菌在不同铁离子浓度培养基中的传代进化,筛选鉴定社会欺骗者,探究其表型特征。本研究的主要发现归纳如下:PAO1野生型菌株在高铁离子浓度的培养基中传代培养,分离到新型的社会欺骗者,该突变体非典型的las R基因突变,而是发生pilD基因突变。pilD突变体比野生型具有生长竞争优势,甚至具有比las R突变体更强的竞争优势。pilD突变破坏IV型菌毛形成,严重抑制细菌的蹭行运动,同时破坏菌株弹性蛋白酶的分泌运输。pilD突变导致Las R、Rhl R活性降低。pilD突变对绿脓菌素的产生无显著影响,以及仍保留产生氰化氢功能,可比las R突变获得更多生存竞争优势。pilD突变对生物膜的产生无明显抑制作用。pilD突变体对环丙沙星的抗药性无显著影响。转录组测序初步结果表明,高浓度铁离子对pilD突变体的基因表达无显著影响。本文从社会进化入手,解析铁与社会微生物学行为的联系及其内在的分子机制。为铜绿假单胞菌社会微生物学研究的提供一个提供崭新的思路和理念,为进一步研究铜绿假单胞菌种群的进化和稳定寻找新的突破口。
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