光皮木瓜黄酮类物质的提取及抗氧化性研究

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光皮木瓜在我国种植广泛,因其含有黄酮类物质等功能成分而具有广阔的开发应用前景。深入研究光皮木瓜中黄酮类物质的提取及抗氧化性,对于阐明光皮木瓜中黄酮的功能特性,促进其深加工利用具有理论和现实意义。本文以光皮木瓜为研究对象,采用有机溶剂浸提、超声波辅助提取、大孔树脂分离纯化等技术,系统研究了光皮木瓜中黄酮的提取、纯化方法,利用高效液相-四级杆串联飞行时间质谱联用技术分离鉴定了光皮木瓜中黄酮的主要成分,并在此基础上,对光皮木瓜黄酮的抗氧化性进行了研究,主要研究结果如下:1、由单因素试验和Box-Behnken试验设计及其分析结果获得的有机溶剂浸提法提取光皮木瓜中黄酮的最佳工艺参数为:乙醇体积分数90%、温度65℃、液料比22.5:1、提取时间4h,在此工艺条件下,黄酮的得率为3.40mg-g,1。通过单因素试验及正交试验,超声波辅助提取光皮木瓜中黄酮的最佳工艺参数为:乙醇浓度为90%、液料比20:1、超声功率360W、超声时间40min、超声温度60℃、提取次数2次,在此工艺条件下,黄酮的得率为3.43mg.g-1。2、通过静态吸附-解吸试验比较AB-8、D101、S-8、X-5和NKA-9等5种大孔树脂的吸附性能,确定D101大孔树脂为光皮木瓜总黄酮的纯化树脂。动态吸附-解吸试验表明,当柱体积为80mL,上样流速1.5mL.min-1时,其达到泄露终点时的吸附量为180mg,乙醇浓度为30%时有较好的洗脱效果。3、采用高效液相-四级杆串联飞行时间质谱联用技术分离并初步鉴定出光皮木瓜中6种黄酮成分,分别为异牡荆素、儿茶精、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷、牡荆素、木犀草素类-3’,7-二葡萄糖糖苷、6-C-木糖-8-C-葡萄糖芹菜素。4、以抗坏血酸作为对照,测定了纯化前后光皮木瓜总黄酮对DPPH自由基,羟基自由基(OH-)的清除能力及其还原能力,结果表明,对DPPH自由基清除能力大小顺序为:纯化后黄酮>粗黄酮>抗坏血酸,对羟基自由基清除能力大小顺序为:粗黄酮>纯化后黄酮>抗坏血酸,还原能力大小顺序为:纯化后黄酮>粗黄酮>抗坏血酸。
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