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研究背景:急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease, aGVHD)是影响异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)总体疗效的重要因素。目前aGVHD的诊断仍主要依靠临床表现,但由于部分病例临床表现的不典型性及主观性判断等因素存在,aGVHD诊断仍不完善。因此,寻找客观且特异的诊断性生物学标记物对于aGVHD的预警、诊断、治疗及预后显得尤为重要。我们的前期研究及预实验发现lncRNA NONHSAT040475在慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease, cGVHD)患者中表达为上调,且与对照组(正常健康人或无cGVHD的移植后患者)差异明显。因此我们进一步探究该lncRNA表达水平与aGVHD发生的关系。研究目的:本研究旨在探究异基因造血干细胞移植后lncRNANONHSAT040475在aGVHD患者中的表达变化及临床意义。为寻找aGVHD客观且特异的生物学标志物,并建立aGVHD预警、诊断及开发靶向药物奠定基础。研究方法:(1)采集异基因造血干细胞移植后100天内患者的新鲜外周血,其中发生aGVHD患者23例,未发生aGVHD患者24例。另收集同期健康志愿者标本22例。共计69例。对同一 aGVHD患者同时收集其粒细胞植入后不同时间点及治疗前后的标本。此外,收集同期发生植入综合征、肠道感染、药物性肝损害及药疹患者的标本各5例。(2)统计入组病例的临床特点,如在年龄、性别、移植类型、疾病状态、预处理方案及原发病类型方面有无显著统计学差异。(3 )对收集的三组临床标本分别提取单个核细胞,抽提总RNA,反转录制备cDNA,最后利用定量PCR方法检测lncRNANONHSAT040475在aGVHD患者、非aGVHD患者及健康志愿者之间的表达差异。(4) 利用定量PCR方法检测同一 aGVHD患者粒细胞植入后不同时间点及发病时和治疗缓解后该lncRNA的表达变化。(5 )利用定量PCR方法检测aGVHD患者及植入综合征、肠道感染、药物性肝损伤、药疹等患者中该lncRNA的表达差异。研究结果:(1) aGVHD组及非aGVHD组患者在年龄、性别、原发疾病、移植时疾病状态、移植类型、预处理方法等方面没有显著统计学差异。(2 )与非aGVHD及健康人相比,aGVHD患者外周血单个核细胞中lncRNA NONHSAT040475的表达水平显著升高(P<0. 01)。此外,通过绘制受试者工作特征曲线(ROC )发现lncRNA NONHSAT040475作为aGVHD的诊断性生物学标记物具有较高的准确性。(AUC=0. 859 )。(3 )对于同一 aGVHD患者,与发病时相比,其lncRNA表达水平在治疗缓解后显著降低(P<0. 05 )。(4) aGVHD严重程度为Ⅰ-Ⅱ度与Ⅲ-Ⅳ度患者之间的lncRNA表达水平无显著差异,证明aGVHD的严重程度分级与该lncRNA的表达水平之间无明显关联。(5)与aGVHD患者相比,该lncRNA在植入综合征、肠道感染、药物性肝损伤、药疹等患者中的表达均较低(P<0. 05 )。(6 )在aGVHD临床表现出现前3-5天,患者lncRNA NONSAT040475表达水平即出现明显的升高趋势,并在治疗后降至正常水平。但需要继续扩大样本量验证。结论:(1 ) lncRNANONHSAT040475可能为aGVHD的诊断和鉴别诊断提供一种方法。(2 ) aGVHD的严重程度分级与lncRNANONHSAT040475的表达水平之间无明显关联。(3 ) lncRNANONSAT040475可能为aGVHD预警提供了新的线索。