抗菌海洋放线菌的筛选及其次级代谢物的分离与结构解析

来源 :曲阜师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chiyulong2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
放线菌是多种生物活性天然产物的潜在来源,在微生物药物开发中具有重要的作用。海洋放线菌由于其特殊的生长环境造成了与陆地放线菌不同的代谢途径,能够产生具有生物活性的天然产物,是天然药用化合物的重要生产者。从不同海洋环境中筛选放线菌,并对其次级代谢产物分离提取寻找生物活性物质具有重要意义。本文通过对日照海岸线海洋沉积物中放线菌的筛选,揭示了日照海岸线放线菌的分布、抑菌潜力及其多样性。主要研究结果如下:(1)采用五种不同的筛选培养基以及五种不同的预处理方法进行放线菌的筛选一共得到208株放线菌。牛津杯法被用来检测抑菌活性,其中91株具有抑菌活性。35株对产气杆菌(Aerobacter aerogenes)CGMCC 1.183有抑制作用,25株对变形杆菌(Proteus)CGMCC 1.491有抑制作用,17株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC25923有抑制作用,9株对大肠杆菌(Escherichia coli)ATCC25922有抑制作用,2株对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)CGMCC 1.15148有抑制作用,3株对黄曲霉(Aspergillus flavus)CGMCC 3.3950有抑制作用。然后,选取25株抗菌活性较好的菌株,以16S rRNA基因为基础,对其进行系统进化研究,25株菌可以分为22个种,属于三个不同的属:链霉菌属(18株),拟诺卡氏菌属(4株)和糖单胞菌属(3株)。(2)通过单因素实验确定了海洋灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)SSGRZ-F8菌株最佳发酵条件。在此实验中结果表明菌株SSGRZ-F8产抑菌活性物质的最佳培养时间为11天,最佳接种量为8%,最佳培养温度为30℃,最佳初始pH为8。通过发酵条件的优化,菌株SSGRZ-F8对金黄色葡萄球菌、产气杆菌以及变形杆菌的抑菌圈直径分别提高了8 mm、12 mm、7 mm。同时进行了菌株所产抑菌活性物质性质的研究,发现抑菌活性物质具有较好的酸碱稳定性、热稳定性、光照稳定性以及遗传稳定性。(3)运用葡聚糖凝胶LH-20柱层析、反向MPLC以及HPLC等分离方法从发酵液有机相中分离得到5个单体化合物。利用一维核磁、二维核磁以及LC-MS鉴定五个化合物分别为:化合物1[cyclo(L-Val-L-Pro)]、化合物2[cyclo(L-Pro-L-Leu)]、化合物3[cyclo(L-Pro-L-Tyr)]、化合物4(N-acetyltyramine)、化合物5[cyclo(L-Pro-L-Phe)]。运用732阳离子交换树脂、AB-8大孔树脂以及葡聚糖凝胶G-25柱层析等分离方法从发酵液水相中得到复合物Z3.(4)对化合物1-5和复合物Z3进行了生物活性的测定,结果表明化合物3对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、产气杆菌的最小抑菌浓度分别是160μg/mL、120μg/mL、100μg/mL,化合物5对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、产气杆菌的最小抑菌浓度分别是180μg/mL、150μg/mL、130μg/mL,复合物Z3对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、产气杆菌的最小抑菌浓度分别是100μg/mL、30μg/mL、20μg/mL。同时还发现化合物1、2、3、5能够抑制A549细胞的侵袭与迁徙。
其他文献
<正>本文以黄酒"勾况"的有关史料和传说为背景,对勾况的起源和发展脉络进行了梳理,对于什么是匀兑、为什么要勾况以及黄酒业勾况工艺的深化与发展等问题进行了深入的思考与剖
一般认为,判断句的谓语由名词或名词性词组充当,是根据谓语语法特点及主谓语的语义关系为标准的。但从《孟子》看,非名词——主谓结构、动宾结构、动词、形容词作判断句谓语
积极乐观心态是防病治病“良药”。当前,在党中央的坚强领导和统一指挥下,应对新冠肺炎疫情防控战正有条不紊地开展。但是,在公众中仍然存在一些不良心态,集中表现为:焦虑恐慌、麻
报纸
介绍了文本分类的思想,探讨了通过决策树学习来对文本进行有效分类的过程。
介绍了调度员培训仿真系统(DTS)的概念和发展情况,对DTS的软件结构和应用功能作了简要介绍.同时探讨了DTS所包含有的教学功能.并在此基础上分析了DTS在电力系统专业教学领域应用
目的了解湖南省南部地区祁阳县和冷水滩区肝吸虫流行现状、流行因素和居民对肝吸虫病的知、信、行情况,探讨肝吸虫病高发区全民驱虫和健康教育综合干预的效果,为制定肝吸虫病
ISO9000体系与零缺陷是目前影响较广泛、较深远的2种质量管理方法。本文从企业管理的角度出发,以提升企业经营业绩为指导,对ISO9000八项质量管理原则和零缺陷的四项基本原则
图形符号是以图形或图像为主要特征的视觉符号,它用绘画、书写、印刷或其他方法制作,用来传递事物或概念对象的信息,而不依赖语言。
1 正确理解高血压危象的概念以往的文献和教科书中曾出现过的有关对高血压危象的术语很多,如:高血压急症、高血压危象、重症高血压危象、高血压脑病、恶性高血压、急进型高血压
本文针对山区中职校学生心理健康现状,提出要改变目前中职生难教难管问题,提高教育教学质量,就是要加大教学改革力度,更新教学理念,切实关注学生的心理需求和成长规律,并从教