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目的:探究非哺乳期乳腺炎(non-puerperal mastitis,NPM)患者乳腺病变组织的菌群分布种类、数量以及可能的细菌致病通路,为临床针对性抗菌药物的治疗提供理论依据。对象和方法:1.研究对象:筛选2019年1月-2019年12月在南昌大学第一附属医院乳腺外科住院部就诊的经组织病理学确诊非哺乳期乳腺炎患者10例作为NPM组,乳腺良性肿瘤患者8例作为对照组。2.研究方法:收集NPM患者乳腺病变组织及乳腺良性肿瘤患者瘤旁正常组织,提取组织菌群DNA,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增后行16S核糖体RNA(16S ribosomalRNA,16S rRNA)测序。系统分析NPM患者炎症组织菌群的特征,比较NPM组与对照组的差异,对其可能参与疾病的发生发展机制进行研究。结果:1、物种组成情况:我们共获得959684个高质量的基因序列。将基因序列比对GREENGENES数据库后一共得到8090个OTU,其中NPM组为3696个OUT,对照组OTU数为2836个,两组重叠的OTU数为1558个。2、物种差异性分析:分析显示两组差异性较大,有21个属菌种的丰度差异有统计学意义,如:异常球菌属(Deinococcus)、细杆菌属(Microbacterium)、土壤球菌属(Agrococcus)、醋杆菌属(Acetobacter)、硝化螺菌属(Nitrospira)、短状杆菌属(Brachybacterium)、嗜冷杆菌属(Psychrobacter)、沃氏菌属(Wautersiella)、贪嗜菌属(Variovorax)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、Turicibacter、放线菌属(Actinomyces)、短杆菌属(Brevibacterium)、奈瑟菌属(Neisseria)、新属(Ethanoligenens)、梭菌属(Clostridium)、肉食杆菌属(Carnobacterium)、微球菌属(Micrococcus)、Sediminibacterium、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)。3、物种多样性分析:物种的α多样性分析中,simpson指数(P=0.034),chao1指数(P=0.083)、faith_pd指数(P=0.360)、observed_otu指数(P=0.083)、shannon指数(P=0.101),菌群的β多样性分析显示两组之间不存在差异性。4、样本微生物组成功能预测分析发现测序得到的936143个基因被富集到330条京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路中。这些微生物的功能基因在主要参与新陈代谢、生物体系统、细胞过程、环境信息处理、遗传信息处理以及人类疾病六大类。组间微生物群落预测功能在组间有24个通路具有显著性差异,比如:细胞过程-细胞活性-细菌运动性蛋白质(Cellular Processes-Cell Motility-Bacterial motility proteins);环境信息处理-膜运输-转运蛋白(Environmental Information Processing-Membrane Transport-Transporters);非保密-细胞处理和信号-细胞分裂(Unclassified-Cellular Processes and Signaling-Cell division);细胞过程-细胞生长和死亡-细胞凋亡(Cellular Processes-Cell Growth and Death-Apoptosis);细胞过程-运输和分解代谢-内吞作用(Cellular Processes-Transport and Catabolism-Endocytosis);人类疾病-感染性疾病-致病性大肠杆菌感染(Human Diseases-Infectious DiseasesPathogenic Escherichia coli infection);新成代谢-脂质代谢-不饱和脂肪酸代谢(Metabolism-Lipid Metabolism-Biosynthesis of unsaturated fatty acids);新陈代谢-碳水化合物代谢-果糖和甘露糖代谢(Metabolism-Carbohydrate MetabolismFructose and mannose metabolism)等通路。结论:1、在NPM患者的病变组织和乳腺良性肿瘤患者的瘤旁正常组织的菌群结构及种类存在明显差异;结构:NPM组组织的菌群结构单一、多样性差可能预示菌群失调,这或许是致病的一个因素。种类:某些菌群的差异,比如丙酸杆菌、大芬戈尔菌等在NPM患者组织中表达远高于对照组,这些可能与NPM致病相关。2、生物群落预测功能在组间差异性分析发现脂质代谢异常、免疫系统-Fc-γ介导的吞噬作用可能与NPM的发病相关,具体机制有待进一步的研究。3、通过NPM的病变组织进行16S rRNA高通量测序分析是一种高效的多维度对组织微生物群落分布的精确定量的检测手段。