【摘 要】
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辣椒(Capsicum annuum L.)是一种重要的蔬菜,又是重要的调味品。但生产中辣椒病害较多,其中80%是由真菌引起的,对其产量和品质的影响较大。近年来,人们开始尝试通过遗传转化
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辣椒(Capsicum annuum L.)是一种重要的蔬菜,又是重要的调味品。但生产中辣椒病害较多,其中80%是由真菌引起的,对其产量和品质的影响较大。近年来,人们开始尝试通过遗传转化有目的地将抗病基因导入辣椒品种,从中选育抗病、丰产、优质的辣椒新品种。虽然国内外这方面的研究较多,但所取得的成效却甚微,其主要原因是辣椒再生较为困难,以农杆菌介导的遗传转化体系还不成熟。本研究在已建立的辣椒再生体系基础上,对农杆菌介导的转化条件进行了优化,并对木霉几丁质酶基因和烟草β-1,3-葡聚糖酶基因转化植株抗疫霉菌抗性和表型特征进行了鉴定。目前取得的主要研究结果是:1.建立了农杆菌介导的辣椒转化体系。其中,下胚轴对农杆菌的敏感性高于子叶;外植体芽分化及生根阶段,适宜的Km浓度选择压分别为50 mg/L和25 mg/L;农杆菌侵染的适宜时间为5~8 min;预培养、共培养、延迟选择培养的最佳时间为2d;500 mg/L的羧苄青霉素可有效抑制农杆菌的生长;根诱导阶段以200 mg/L头孢霉素代替羧苄青霉素有利于根的诱导。2.获得了转基因植株。以辣椒下胚轴为受体材料,通过农杆菌介导法将Chi和Glu基因导入了3个辣椒品种,经PCR检测获得了阳性转基因植株28株,转化率达26%。3.转化再生植株抗病性鉴定结果表明,转基因植株对疫霉菌抗性表现不一,其中20.59 %表现出对疫霉菌有较强的抗性。4.T0代植株有矮化的趋势,表现在第1花序节位呈降低态势,第5杈花朵的花瓣和叶片长也有所减小;始花节位的叶片长、宽和叶柄长度以及第五杈花朵的花瓣长度减小。但果实纵径、横径、果肩宽和平均单果重却有增大趋势。
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