鹅不食草抗肿瘤活性成分及其指纹图谱研究

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鹅不食草(Centipeda minima(L.)A.Br.et Ascher.)系菊科(Composit ae)石胡荽属植物。该药材收载于《中国药典》(2005年版一部),现代药理研究表明,鹅不食草具有抗肿瘤的生理活性。本论文在前人对鹅不食草研究的基础上,对鹅不食草抗肿瘤活性部位的化学成分、抗肿瘤活性成分的筛选、超临界CO2萃取工艺及其指纹图谱进行了相关研究。采用溶剂法和色谱法对该植物的有效部位进行了提取分离研究,从中分离得到13个单体成分,鉴定了其中的9个化合物,分别为蒲公英甾醇(Ⅰ)、伪蒲公英甾醇(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ)、β-胡萝卜苷(Ⅵ)、短叶老鹳草素(Ⅶ)、当归酸四氢堆心菊灵内酯(Ⅸ)、2-四氢堆心菊灵(Ⅹ)、堆心菊灵(Ⅻ)、豆甾醇-3-0-β-D-吡喃葡萄糖苷(ⅩⅢ)。其中,伪蒲公英甾醇、当归酸四氢堆心菊灵内酯、2一四氢堆心菊灵为首次从石胡荽属植物中发现。采用正交试验法对鹅不食草的超临界CO2萃取条件进行了优选研究,研究结果表明,萃取压力是影响萃取率的主要因素,其次为萃取温度、CO2流量和萃取时间。最佳萃取条件为:萃取压力30MPa,萃取温度50℃,萃取时间1h,CO2流量25kg/h。为了综合评价鹅不食草药材及其有效部位的质量,本文按照国家食品药品监督管理局《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》(暂行),采用气相色谱法建立了鹅不食草超临界CO2萃取物的指纹图谱,确立了33个共有峰,各项技术参数符合有关规定。从而为鹅不食草药材及其有效部位的质量控制提供了科学依据。以95D肺癌细胞和黑色素瘤A375细胞为筛选指标,对鹅不食草不同极性溶剂提取物及从中分离的单体成分进行了抗肿瘤活性筛选研究。研究结果表明,溶剂法萃取的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和超临界CO2萃取物对95D肺癌细胞均具有一定抑制作用;从乙酸乙酯部位分离得到的单体成分中,化合物xj2、xj4、xj6、xj9、xj11、xj12对黑色素瘤A375细胞具有抑制作用,其中xj6、xj12抑制效果明显,经鉴定,xj6为短叶老鹳草素,xj12为2-四氢堆心菊灵。
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