梨(Pyrus)叶片和叶柄再生体系建立的研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dinghailing
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本研究以梨(Pyrus)栽培品种砀山酥、早酥、八月红和水晶梨为试验材料。通过对影响梨茎段离体培养和叶片、叶柄离体再生不定芽的若干因素的研究,从不同外植体水平上建立了梨再生体系。建立了四个梨品种茎段离体再生体系。采用室内催芽茎段为外植体效果优于生长季节田间茎段;室内茎段用0.1% HgCl2消毒的适宜时间为6~7 min;外植体芽诱导的适宜培养基为1/2 MS+BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1。梨茎增殖的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.1~0.2 mg·L-1;基本培养基对梨茎增殖和生长势有明显影响,MS是适宜的基本培养基,基因型是影响梨茎增殖的主要因素;白砂糖、葡萄糖和蔗糖对梨茎增殖影响不显著。暗培养3~5d可显著提高茎段生根效率;八月红梨在1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1培养基上生根率为61.2%。试验从四个梨品种叶片上再生出不定芽,其中砀山酥、早酥和八月红梨叶片再生不定芽为首次得到。建立起八月红和水晶梨叶片高效再生不定芽体系。在最佳条件下,八月红和水晶梨叶片再生频率达到100%和77.8%,平均再生芽数为5.78和3.17。基因型是影响梨叶片再生的关键因素,八月红梨叶片再生效率高于其它三个品种。暗培养对于叶片再生不定芽不是必需的,但接种在再生培养基上的叶片进行20d的暗培养,可显著提高梨叶片再生不定芽效率。基本培养基以NN69为适宜。用同浓度葡萄糖代替NN69培养基中蔗糖,对八月红梨叶片再生效率的影响不显著;用白砂糖替代蔗糖,显著降低了叶片再生效率。细胞分裂素和生长素是影响梨叶片再生的又一关键因素。八月红梨叶片再生中采用BA和IAA,适宜浓度为5. 0 mg·L-1,IAA 0.5 mg·L-1;TDZ与BA、ZT相比,TDZ是一种适宜梨叶片再生的外源细胞分裂素,ZT不适宜梨叶片再生;TDZ与生长素IAA、IBA和NAA的不同组合,可显著影响梨叶片再生效率,IBA适宜于八月红梨叶片再生,IAA适宜于水晶梨叶片再生。外植体种类和接种方向也影响梨叶片再生。采用试管苗顶部幼嫩叶片和接种时远轴面向下可显著提高梨叶片再生效率。培养基上附加AgNO3 0.5 mg· L-1可显著提高八月红梨叶片再生效率。首次从八月红、水晶和早酥梨叶柄上再生出不定芽。在NN69+TDZ 1.0 mg·L-1培养基上,八月红梨叶柄再生频率为45.5%,平均再生芽数为0.79;水晶梨在NN69+TDZ 1.0 mg·L-1+IAA 0.5 mg·L-1培养基上,叶柄再生频率为42.4%,平均再生芽数为1.0。细胞分裂素中TDZ适宜于梨叶柄再生,ZT对叶柄再生没有作用;TDZ与生长素IBA、IAA和NAA的不同组合,可明显影响叶柄再生效率。AgNO3 (0.1~1.5 mg·L-1)对梨叶柄再生有促进作用。
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