人类谷胱甘肽转移酶Omega2和人类RNA结合蛋白KHDRBS基因的克隆和功能研究

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谷胱甘肽转移酶是一类广谱分布的多功能酶.这类蛋白酶在细胞解毒功能中起着关键作用.谷胱甘肽转移酶Omega亚家族是最新发现的一个亚家族,具有一些特有的新结构和功能.人类谷胱甘肽转移酶Omega亚家族成员1(GSTO1-1)能催化无机砷生物转化的限速反应,可能是砷在个体中产生高毒性的遗传基础,同时与癌症治疗中产生的耐受有关.谷胱甘肽转移酶Omega亚家族基因定位在10号染色体上,染色体定位、EST分析都显示Omega家族基因可能与多种癌症和疾病相关.该实验室克隆到了人类谷胱甘肽转移酶Omega亚家族成员2(GSTO2),并对其进行了初步研究.GSTO2 cDNA序列全长1179bp,编码243个氨基酸的蛋白产物,推测分子量为28.2 kDa,等电点为7.51,与人类谷胱甘肽转移酶Omega亚家族成员1(GSTO1-1)基因在氨基酸水平上的同源性为64﹪.GSTO2具有依赖谷胱甘肽的二脱氢抗坏血酸盐还原酶活性和依赖谷胱甘肽的乙酰转移酶活性,但是与GSTO1-1不同,GSTO2的这两种酶活性并不高,而且GSTO2表现出很高的催化CDNB反应的酶活性.用2μmol/L NaAsO<,2>的诱导L-02细胞,GSTO2表达量大大增加,表明GSTO2与砷代谢有关.经NaAsO<,2>诱导的L-02细胞周期有显著改变,而QGY-7703细胞周期无明显改变;GSTO2能促进L-02细胞的凋亡,但对QGY-7703细胞没有明显促进凋亡的作用.综上所述,GSTO2是一个癌症相关基因,可能在砷代谢、细胞凋亡和细胞周期中具有重要作用,深入研究GSTO2的功能将对癌症治疗具有重要意义.类Sam68哺乳动物蛋白1(SLM-1),是一个RNA结合蛋白,在有丝分裂中被Src酪氨酸磷酸化.该实验室克隆到了一条人类STAR家族新基因,与小鼠和大鼠SLM-1基因在氨基酸水平上的同源度均为94.8﹪.该基因cDNA具有1 876个碱基,推测编码的蛋白具有349个氨基酸.它有一个STAR结构域,其中包含一个KH结构域,命名为信号传导相关RNA结合KH结构域包含蛋白基因2(KHDRBS2).RT-PCR分析KHDRBS2在各种组织中广谱表达.通过原核表达纯化,我们得到了GST-KHDRBS2融合蛋白.KHDRBS2可能是一个RNA结合蛋白,可能在联系酪氨酸激酶信号途径和RNA代谢的某些方面中起作用.
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