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本文采用SiO2-IDA-Ni2+，NiSiO3，Fe3O4@NixSiOy及NiO微纳米材料作为亲和吸附剂，利用Ni2+与六聚组氨酸的亲和作用，对以六聚组氨酸为标签的蛋白质进行分离、提纯，并结合多种现代分析手段表征其形貌、结构及性能，评价其对蛋白质的分离能力。本论文的主要研究内容及结论如下：(1) SiO2纳米微球的制备，功能化及其亲和分离His-tagged蛋白以正硅酸乙酯（TEOS）水解的方法制备出粒径在200nm左右的SiO2纳米微球，通过环氧基硅烷偶联剂和螯合配体对其表面进行修饰，经吸附Ni2+形成SiO2-IDA-Ni2+纳米微球，用于分离纯化His-tagged融合蛋白。利用SEM、FTIR、TG、BET等分析了纳米微球的表面形貌、结构及组成，并用SDS-PAGE对其分离纯化的His-tagged融合蛋白进行表征，用BCA蛋白定量试剂盒对分离的蛋白量进行了定量分析。结果表明，SiO2-IDA-Ni2+复合微球对His-tagged蛋白具有良好的分离效果，其吸附量可达28.3mg/g。(2)中空NiSiO3纳米微球的制备及其亲和分离His-tagged蛋白以SiO2纳米微球为模板，通过水热处理得到中空结构的NiSiO3纳米微球，采用SEM、HRTEM、XRD和XPS对样品的形貌、结构、性能等进行系统表征。纳米微球内外表面具有较多Ni2+位点，可作为亲和吸附剂直接用于分离纯化His-tagged蛋白质，简化了实验过程。结果表明，中空NiSiO3纳米微球在分离纯化蛋白质方面表现出良好的特异性，分离效果甚好，且多次重复利用之后仍可保持良好的分离效果，具有很好的再生能力。(3) Fe3O4@NixSiOy微球的制备及其亲和分离His-tagged蛋白水热法合成具有磁性的Fe3O4微球，通过溶胶-凝胶法在Fe3O4表面包覆一层SiO2壳层，与NiCl2的碱溶液在高压釜中反应，得到具有层状壳层的Fe3O4@NixSiOy磁性复合纳米微球。采用SEM、HRTEM、XRD、XPS和VSM对其形貌、结构和磁性能进行了表征，将其用于分离纯化His-tagged蛋白质，考察了不同条件对分离效果的影响，并采用SDS-PAGE对所分离的蛋白进行了分析。实验证明，将Fe3O4@NixSiOy纳米微球用于分离纯化蛋白质，在外加磁场作用下，加快了分离速度，且分离效果良好。(4) NiO的制备及其亲和分离His-tagged蛋白质采用水热法合成了表面由纳米片垂直排列堆积的NiO微球，考察了影响其形貌的因素，并对其形貌和性质表征。将其用以分离纯化His-tagged蛋白质，考察了不同条件下的分离效果，用SDS-PAGE对结果进行了表征，并用BCA定量测试进行验证。