目前,关于mCD14在参与LPS激活骨髓源性细胞(尤其是巨噬细胞和中性粒细胞)中的作用已有一些研究报道.研究表明mCD14在低浓度LPS激活巨噬细胞中是必需的;枯否氏细胞(KC)是体内最大的组织巨噬细胞群,由于其所处位置的特殊性,它可能具有一些不同于其它巨噬细胞的特征.因此,KC的激活及其功能性反应对局部肝组织甚至全身的损伤有十分重要的意义.迄今,关于LPS激活KC的分子机制及其确切的信号转导途径尚未完全清楚,近年有人认为LPS激活KC并非mCD14依赖的,而与Toll受体介导有关.Toll是一种果蝇个体发育和先天性免疫所必需的基因.人细胞中Toll蛋白的类似物称为Toll样受体(TLRs).目前已克隆了6种人的TLRs,即TLR1~6.其中研究较多的是TLR2和TLR4.研究证实:TLR2和TLR4均能有效地作为LPS受体并参与细胞的激活,其中尤以TLR4更为重要.TLR4缺乏或突变小鼠的巨噬细胞不能参与LPS反应.然而,对TLRs的研究还有很多问题需要解决:诸如LPS是直接作为TLRs的配体还是通过尚不知晓的方式产生配体来发挥其激活细胞的功能;TLRs介导细胞激活所引起的细胞内信号转导途径;TLRs的分布、合成及调节规律;TLRs与CD14的关系等.该实验旨在应用细胞原代培养、光镜和电镜观察、免疫组化、RT-PCR、图像分析、放免分析等方法探讨以下问题:(1)LPS对KC受体CD14和TLR4的调节;(2)LPS激活KC后产生的活性介质对CD14和TLR4表达的影响;(3)丝裂源激活的蛋白激酶(MAPK)途径对KC细胞因子(TNF-α、IL-6等)、NO产生的影响;(4)LPS激活KC后产生的活性介质对肝细胞的损害作用.