目的:探究川陈皮素(Nob)对抗铁过载损伤保护HUVECs的机制研究以及与ROS/ADMA/DDAHⅡ/eNOS/NO通路之间的关系。方法:实验随机分为7组:(1)Control组;(2)DTF组;(3)20μM Nob+DTF组;(4)20μMNob+pAD/DDAHⅡ-shRNA+DTF组;(5)1 mM L-Arg+DTF组;(6)1μM CsA+DTF组;(7)100μM Eda+DTF组。MTS检测细胞存活率,检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,酶标仪检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放的程度;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS),线粒体膜电位;TUNEL以及Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blotting(免疫印迹)检测DDAHⅡ、eNOS以及p-eNOS、Cleaved Caspase-3蛋白的表达;HPLC检测ADMA含量以及DDAHⅡ活性。结果:1.川陈皮素能提高铁过载内皮细胞存活率,降低乳酸脱氢酶LDH活性。2.20μM川陈皮素能显著降低ROS的生成,提高DDAHⅡ以及p-eNOS蛋白的表达和NO含量,降低ADMA含量,抑制mPTP开放,稳定细胞膜电位,减少细胞凋亡;感染pAD/DDAHⅡ-shRNA腺病毒下调DDAHⅡ表达后可以取消或减弱上述作用。结论:川陈皮素保护铁过载HUVECs内皮细胞是通过抑制ROS生成,上调DDAHⅡ以及eNOS磷酸化,降低ADMA含量和升高NO含量从而减少细胞凋亡。