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稻米资源中蕴含丰富的生物活性物质,具有良好的抗氧化、降血压和提高免疫力的功效。大米活性肽(RBP)可根据其功能效应分为大米抗氧化肽、大米降血压肽、大米风味肽、大米免疫活性肽和阿片活性肽等。本课题组一直潜心于研究大米活性肽的抗氧化功能及作用机理,在前期的研究中发现,大米活性肽在过氧化氢(H202)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)氧化应激中有良好的抑制效果,这不仅体现在细胞水平,在蛋白水平也出现明显的差异。因此我们推测,大米活性肽可以通过刺激某些信号通路的调控,达到抑制氧化应激的效果。本论文介绍了血管内皮细胞常见的损伤机制,不同损伤机制分别涉及的信号通路,重点介绍了氧化损伤应激相关信号通路。在此基础上,通过70 μmol/L H2O2损伤HUVEC,经0.2 mg/mL RBP预处理24小时后,通过Western blot检测血管内皮细胞相关凋亡因子NF-κB、p38MAPK、IKKβ激活前后在H202氧化应激损伤以及大米活性肽保护前后的表达变化,以此探究RBP对氧化损伤内皮细胞NF-κB信号通路的影响。实验结果显示,H202损伤组(70 μmol/L) NF-κB蛋白、P-NF-κB蛋白、p38MAPK蛋白、p-p38MAPK蛋白、IKKP蛋白、p-IKKβ蛋白的表达量与空白对照组比较显著上升。经0.2 mg/mL大米活性肽预处理24小时后,各组NF-κB蛋白、p38MAPK蛋白、p-p38MAPK蛋白、IKKβ蛋白表达量与H202损伤组(70 μmol/L)明显减少；H202损伤组(70μmol/L)与RBP保护组细胞P-NF-κB蛋白表达水平差异不大；RBP保护组细胞p-IKKβ蛋白的表达量多于H202损伤组(70 μmol/L)细胞p-IKKβ蛋白的表达量。研究结果表明,大米活性肽对氧化损伤内皮细胞保护机制与下调NF-κB信号通路上NF-κB蛋白、p38MAPK蛋白、p-p38MAPK蛋白、IKKP蛋白的表达密切相关,通过抑制相关凋亡因子的表达来调控人脐静脉内皮细胞抗氧化损伤能力,从而对人脐静脉内皮细胞起到抗氧化损伤的保护作用。研究发现,NF-κB蛋白和IKK-β蛋白磷酸化激活后,大米活性肽通过上调由H202所致P-NF-κB、p-IKKβ表达的增加而发挥调控作用,研究结果表明氧化损伤内皮细胞NF-κB蛋白、IKKβ蛋白激活前后的表达状态不同,大米活性肽对NF-κB蛋白、IKKβ蛋白激活前后的调控作用也不相同。这将对大米活性肽开发为抗氧化功能性食品及多肽类药物奠定有利的理论基础。