【摘 要】
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背景:重型创伤性颅脑损伤（Severe traumatic brain injury,s TBI）是神经外科常见疾病之一,发病率近年来仍持续上升。重型创伤性颅脑损伤之所以能引起医护及社会的关注,大部分原因是因为高致死率及高致残率带来严重的不良后果,如患者因并发症生活自理困难,生活质量下降严重,给患者本人带来严重心理负担,给患者家庭及社会带来了难以承受的经济负担,所以重型创伤性颅脑损伤不仅仅关乎个人
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背景:重型创伤性颅脑损伤（Severe traumatic brain injury,s TBI）是神经外科常见疾病之一,发病率近年来仍持续上升。重型创伤性颅脑损伤之所以能引起医护及社会的关注,大部分原因是因为高致死率及高致残率带来严重的不良后果,如患者因并发症生活自理困难,生活质量下降严重,给患者本人带来严重心理负担,给患者家庭及社会带来了难以承受的经济负担,所以重型创伤性颅脑损伤不仅仅关乎个人生命健康,也关乎社会经济发展。研究表明重型脑损伤后多种炎症因子释放及炎症反应破坏血脑屏障完整性,在此基本病理变化基础上诱发了血管源性脑水肿、加剧神经元细胞损伤等继发性改变。研究发现祖国传统医学中医中药在创伤性疾病应用中可促进神经修复相关因子表达及减轻炎症反应,促进损伤后修复,但对于中医中药作用于创伤性脑损伤后促神经修复功能的机制研究不够明确。目的:建立重型创伤性颅脑损伤大鼠模型,观察醒神活血通腑方对脑损伤大鼠脑组织内BDNF、NGF、Neu N、i NOS及COX-2表达的影响,探讨其神经功能保护作用及抗炎的机制。方法:应用自由落体法制作SD（Sprague-Dawley）大鼠创伤性颅脑损伤模型,应用随机数表法,将25只（若有意外死亡者做好标记,及时移除实验）SPF级SD雄性健康大鼠（200g?20g）随机分为3组,（1）对照组5只（2）模型组10只（3）醒神活血通腑方组10只。模型组和醒神活血通腑方组采用国际公认改良版Feeney损伤装置制作创伤性颅脑损伤模型,用药组在模型建立前7日起每日给予醒神活血通腑方灌胃处理,对照组和模型组给予0.9%氯化钠灌胃处理,模型建立成功后,由非本实验人员分别于术后第1天,术后第7天,第14天,行改良神经功能损伤程度评分m NSS（modified neurological severity scores）,于术后15d将所有大鼠处死留取标本,每组标本均用于HE染色、免疫组化及免疫印迹,观察TBI后大鼠大脑皮质镜下改变及BDNF、NGF、Neu N、i NOS及COX-2的表达情况。结果:1.采用SD大鼠经硬膜外撞击建立重型创伤性颅脑损伤模型大鼠在颅脑损伤麻醉清醒后精神萎靡,活动减少,表现出明显肢体运动功能障碍（肌力、肌张力等方面）,术后神经功能缺损m NSS评分均在12-18分之间。由此可证明该模型符合本实验造模要求,可用于s TBI后脑损伤的发病机制及治疗的研究。本实验各个分组模型神经功能入组评估评估标准:对照组大鼠均未见神经功能缺损症状,模型组及醒神通腑方组出现明显的因神经功能缺损肢体运动表现,与模型组重型创伤性颅脑损伤大鼠相比,醒神活血通腑方组大鼠神经功能缺损评分有所改善（P＜0.05）。2.组织学观察大鼠TBI后脑组织损伤、细胞凋亡等,在伤后15d醒神活血通腑方组大鼠脑组织各类神经细胞较模型组肿胀不明显,炎症细胞稍有降低。3.免疫组织化学:空白组及模型组可见少量BDNF、NGF及Neu N免疫阳性细胞的表达,醒神活血通腑方组大鼠和模型组相比较BDNF和NGF及Neu N的表达明显增加;醒神活血通腑方组i NOS及COX-2免疫阳性细胞表达较模型组明显减少。4.蛋白印记法检测结果:与空白组相比较,模型组与醒神活血通腑方组BDNF及NGF蛋白表达平均水平均升高（P＜0.01）。与模型组相比,醒神活血通腑方组BDNF及NGF蛋白表达均升高（P＜0.01）。结论:重型创伤性颅脑损伤大鼠应用醒神活血通腑方后可增加损伤处脑组织中BDNF、NGF及Neu N的表达,通过减少i NOS及COX-2等炎症因子的释放,进而减轻受损脑组织周围炎症及脑水肿的发生,有助于辅助神经损伤修复作用。
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