【摘 要】
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目的:证实振荡电场刺激(oscillating field stimulation,OFS)调节在体移植的神经干细胞(neural stem cell,NSC)定向分化和促进脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经功能恢
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目的:证实振荡电场刺激(oscillating field stimulation,OFS)调节在体移植的神经干细胞(neural stem cell,NSC)定向分化和促进脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经功能恢复的作用,并为研究其机制提供理论参考,以求为临床上修复SCI提供新的技术方向。方法:采用随机分组的方式将Sprague Dawley(SD)大鼠分入脊髓损伤组、单纯移植组和联合治疗组三组,分别构建相应的大鼠模型;以BBB大鼠运动功能评分(Basso-Beattie-Bresnahan,BBB)的结果评估大鼠SCI后神经功能恢复情况;利用蛋白质印迹法(Western Blot,WB)、冰冻切片和组织免疫荧光染色(Immunofluorescence,IF)的方法,观察在OFS作用下大鼠损伤脊髓内移植的NSC增殖和分化情况;采用WB和IF的方法检测大鼠SCI后轴突的受损及再生情况。结果:1.在术后第3到5周时,联合治疗组大鼠在各时间点的平均BBB评分均高于单纯移植组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.05);2.WB结果表明术后第3天时,联合治疗组的大鼠脊髓组织中绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)平均表达水平高于单纯移植组,且差异具有统计学意义(P<0.05);3.IF结果显示在术后第3、7和14天时,联合治疗组大鼠脊髓组织切片中呈GFP/β-Tubulin III阳性细胞的平均数量均高于单纯移植组,且差异具有统计学意义(P<0.05);4.IF结果显示在术后第3、7和14天时,联合治疗组大鼠脊髓组织切片中呈GFP/NG2阳性细胞的平均数量均高于单纯移植组,且差异具有统计学意义(P<0.05);5.IF结果显示术后第7和14天时,联合治疗组大鼠脊髓组织切片中呈GFP/S100β阳性细胞的平均数量均低于单纯移植组,且差异具有统计学意义(P<0.05);6.WB结果表明在术后第14天时,联合治疗组的大鼠脊髓组织中神经丝蛋白(neurofilament200,NF-H)平均表达水平高于单纯移植组,且差异具有统计学意义(P<0.05),IF结果显示在术后第14天时,联合治疗组中NF-H染色阳性面积所占比例明显大于单纯移植组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:OFS能够调节大鼠在体移植的NSC定向分化,促进神经元的再生、神经的再髓鞘化及轴突的再生,减少星形胶质瘢痕的形成。相比单纯移植NSC的方式,联合治疗更有助于SCI后大鼠的神经功能恢复。
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