阿卡波糖发酵及分离纯化工艺的研究

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本论文对阿卡波糖的发酵及分离纯化工艺进行了深入的研究。 阿卡波糖是一种α-糖苷酶抑制剂,近年来用于糖尿病的治疗。本文以阿卡波糖产生菌游动放线菌Actinoplanes sp.AC-5为出发菌株(发酵单位为411.6μg/ml),通过对其菌丝片段进行超声波断裂和紫外线诱变处理,得到了高产菌株AC17,摇瓶发酵单位为1416μg/ml。 以菌株AC17为出发菌株,对其斜面培养基组成、斜面培养时间、斜面保藏时间及保藏方式进行了考察,得到了优化的斜面培养基组成和培养、保藏条件。然后又对种子培养条件(包括种子培养基组成、种子培养基初始pH、装瓶量和种龄)进行了优化,得到了适合工业化生产的种子培养基和培养条件。在此基础上,又对发酵培养基的组成(碳源、氮源、无机盐)及发酵条件等方面进行考察,并采用均匀设计的方法对发酵培养基的组成进行了优化;对补料等发酵工艺进行了考察,使发酵单位由原来的1416μg/ml提高到2700μg/ml,基本上达到了工业化发酵的水平。 另外,本论文还对阿卡波糖的分离与纯化工艺进行了研究,初步建立了从发酵液中提取阿卡波糖的工艺过程,得到了含量达87.9%的阿卡波糖粉剂。 本论文还对阿卡波糖的HPLC检测方法进行了改进,建立了对发酵液中阿波糖卡含量直接进行检测的HPLC方法。
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