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乳腺癌是威胁女性生命健康的恶性疾病之一。伴随着影像学诊断技术的进步以及治疗手段的提高,乳腺癌患者的预后获得显著的提高,但肿瘤转移依旧是乳腺癌患者致死的主要原因,更是目前乳腺癌治疗中亟待攻克的难题之一,因此,乳腺肿瘤转移分子机制的研究尤为重要。转录因子ELF5(E74-like factor 5,ESE-2)是ETS(E-twenty-six,ETS)家族成员之一,它在乳腺发育以及乳腺肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。ELF5通过调节细胞内不同信号通路来影响细胞的增殖、生长及分化等过程。在乳腺癌中,ELF5是诱导乳腺肿瘤细胞由表达雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性的luminal亚型向表达ER阴性的basal亚型转化的一个关键调控因子,并抑制细胞获得雌激素敏感表型。另外,ELF5与癌症的发生和发展也密切相关,我们通过基因表达定量分析,发现ELF5能够显著抑制STAT3 mRNA表达水平,但二者之间的作用关系及其在乳腺肿瘤细胞中所扮演的角色尚未确定。因此,本文以ELF5通过STAT3信号通路对乳腺肿瘤细胞增殖和转移的分子机制进行研究。首先,探究ELF5在乳腺肿瘤细胞系中的作用。通过MTT、细胞划痕、小室侵袭、细胞凋亡等实验验证了ELF5对乳腺癌细胞功能的影响。研究发现,在MCF-7细胞中过表达ELF5后,细胞增殖、转移和侵袭的能力明显降低;在T47D细胞中使用RNA干扰技术降低ELF5的表达后,细胞增殖、转移和侵袭的能力显著性提高。另外,在MCF-7细胞中过表达ELF5后,早期细胞凋亡数由2.6%增加到21%,晚期细胞凋亡数由12.2%增加到22.6%。其次,探究ELF5与乳腺癌转移相关信号通路关键因子的关系。通过实时定量PCR、Western blot等方法检测了ELF5对乳腺癌转移相关的关键因子以及相关靶基因表达的影响。检测结果发现ELF5能够明显减弱STAT3 mRNA和蛋白表达水平,然而并不能影响MMP2、CTNB1、CYP1a1的mRNA水平。再次,探究ELF5对肿瘤细胞迁移标志分子CD24的调控作用。采用荧光素报告基因实验和ChIP实验探究ELF5与CD24之间的调控关系,发现ELF5可靶向结合到CD24的启动子区域,并且呈剂量依赖性激活CD24的转录。最后,探究ELF5、CD24和STAT3三者之间的联系。通过RNA干扰技术降低CD24表达后,发现ELF5对STAT3的抑制作用显著减弱,推测ELF5对STAT3转录水平的抑制作用是通过CD24实现的。ELF5抑制STAT3/JAK/TAT信号通路,进而抑制乳腺癌细胞的增殖和转移。以上结果表明:转录因子ELF5作为乳腺肿瘤的抑制因子能够显著抑制乳腺肿瘤细胞MCF-7的增殖、转移和侵袭能力,并且可以促进细胞凋亡。ELF5可靶向结合到CD24的启动子区域,并且呈剂量依赖性激活CD24的转录,ELF5通过调控CD24的表达水平间接抑制STAT3表达,抑制STAT3/JAK/TAT信号通路。该研究有助于了解乳腺肿瘤细胞发生转移的分子机制,为乳腺癌的诊断和治疗提供新思路。