舒芬太尼联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

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目的:研究不同浓度的舒芬太尼单独或联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及上皮间质转化的影响,为肿瘤患者围术期镇痛及癌痛治疗提供依据。方法:培养人非小细胞肺癌A549细胞,将A549细胞培养于采用含10%胎牛血清,1%双抗(青链霉素混合液)的RPMI-1640培养液,置于37℃,5%CO2的培养箱中进行培养。分组为:对照组、舒芬太尼(0.01、0.05、0.25μg/mL)组、顺铂(5μg/mL)组、顺铂(5μg/mL)+舒芬太尼(0.01、0.05、0.25μg/mL)组。CCK-8法和平板集落形成实验检测A549细胞的增殖及克隆能力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,Western blot法检测以下蛋白表达:凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax,上皮间质转化相关蛋白E-cad、N-cad和Vim,自噬相关蛋白p62、LC3。结果:1.随着给药浓度的增加,CCK-8实验和平板形成实验显示舒芬太尼对A549细胞的增值抑制作用增强。流式细胞术表明凋亡细胞增加。Transwell迁移和侵袭实验显示穿模细胞明显减少。Western blot结果显示,同对照组相比,给予舒芬太尼后凋亡相关蛋白Bcl-2表达下降,Bax表达上升,上皮间质转化相关蛋白E-cad表达上升,Vim和N-cad表达下降,自噬相关蛋白p62和LC3-II表达上升;2.随着给药浓度的增加,CCK-8实验和平板形成实验显示舒芬太尼联合顺铂对A549细胞的增值抑制作用增强。流式细胞术表明凋亡细胞增加。Transwell迁移和侵袭实验显示穿模细胞明显减少。Western blot结果显示,同顺铂组相比,联合使用舒芬太尼和顺铂后凋亡相关蛋白Bcl-2表达下降,Bax表达上升,上皮间质转化相关蛋白E-cad表达上升,Vim和N-cad表达下降,自噬相关蛋白p62和LC3-II表达上升。结论:1.舒芬太尼可以抑制人肺腺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化,诱导细胞凋亡,抑制A549细胞的自噬,且呈浓度相关性;2.舒芬太尼可以提高顺铂的化疗敏感性,提高顺铂对人肺腺癌A549细胞的抑制和杀伤能力。
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