白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎大鼠免疫调节机制的研究

来源 :湖北中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:king20051400
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目的:本实验在实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)模型的基础上,通过观察白芍总苷对EAT大鼠在甲状腺功能、甲状腺自身抗体、细胞因子、甲状腺组织病理形态及Fas、FasL表达的影响及作用机制,并与硒酵母片进行对比,分析并探讨白芍总苷治疗自身免疫性甲状腺炎的免疫调节机制。方法:选取健康SPF级雌性SD大鼠40只,体重110±10g,将其随机(按随机数表法)分成4组:正常组、模型组、白芍总苷组、硒酵母片组,每组各10只。第1周各组大鼠适应性喂养,均给予常规饮用水及普通饲料(由实验动物中心提供)。第2-3周初次免疫:将猪甲状腺球蛋白(pTg)抗原溶于PBS溶液中,并与完全弗氏佐剂(CFA)等体积混合充分乳化,除正常组外,在其余组大鼠皮下进行多部位免疫注射,注射pTg抗原100μg/只,每周1次,共2次,同时给予高碘水直到实验结束。第4-7周加强免疫:将pTg抗原与不完全弗氏佐剂(IFA)等体积混合充分乳化,除正常组外,在其余组大鼠皮下进行多部位免疫注射,注射pTg抗原100μg/只,每周1次,共4次。实验第5周大鼠开始灌胃,白芍总苷组每日给予白芍总苷50mg/kg,硒酵母片组每日给予硒酵母片200μg/kg,正常组及模型组每日给予等量生理盐水,连续给药6周。第10周将大鼠处死后,取血清及甲状腺组织,ELISA法检测血清FT3、FT4、TSH、TGAb、TPOAb、IL-10、IFN-γ含量,HE染色及免疫组化法分别观察甲状腺组织病理学改变及Fas、FasL的表达。结果:1.甲状腺功能:模型组血清中FT3、FT4、TSH水平均高于正常组,有显著性差异(P<0.01)。白芍总苷组及硒酵母片组血清FT3、FT4、TSH水平均低于模型组,有显著性差异(P<0.01)。与硒酵母片组相比较,白芍总苷组中血清FT3、FT4水平无明显变化,无显著性差异(P>0.05)。与硒酵母片组相比较,白芍总苷组中血清TSH水平明显降低,有显著性差异(P<0.01)。2.甲状腺组织病理形态:光镜下HE染色显示正常组可见较为完整的滤泡上皮细胞,含有丰富的胶质,未见巨噬细胞和淋巴细胞,上皮细胞未见嗜酸性变。而模型组甲状腺组织间质内淋巴细胞广泛浸润。白芍总苷组和硒酵母片组甲状腺组织间质内淋巴细胞浸润较模型组明显减少。3.甲状腺抗体:模型组血清中TGAb、TPOAb水平均高于正常组,有显著性差异(P<0.01)。白芍总苷组及硒酵母片组血清中TGAb、TPOAb水平均低于模型组,有显著性差异(P<0.01)。与硒酵母片组相比较,白芍总苷组中血清TGAb、TPOAb水平无明显变化,无显著性差异(P>0.05)。4.细胞因子:模型组血清中IL-10水平明显高于正常组,有显著性差异(P<0.01)。白芍总苷组及硒酵母片组血清中IL-10水平均低于模型组,有显著性差异(P<0.01)。与硒酵母片组相比较,白芍总苷组血清中IL-10水平无明显变化,无显著性差异(P>0.05)。模型组血清中IFN-γ水平明显高于正常组,有显著性差异(P<0.01)。白芍总苷组及硒酵母片组血清中IFN-γ水平低于模型组,有显著性差异(P<0.01)。与硒酵母片组相比较,白芍总苷组血清中IFN-γ水平无明显变化,无显著性差异(P>0.05)。5.Fas、FasL:模型组大鼠甲状腺组织中Fas、FasL呈高表达,与正常组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。经药物干预后,Fas、FasL表达明显减少,与模型组比较,均具有统计学差异(P<0.05)。但与硒酵母组比较,白芍总苷组Fas、Fas L表达都减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.白芍总苷能够减少AIT大鼠甲状腺组织间质内淋巴细胞浸润,减轻炎性反应。2.白芍总苷能够降低AIT大鼠血清TGAb和TPOAb的滴度。3.白芍总苷可能通过干预IL-10/IFN-γ的表达水平,即Th1/Th2免疫偏移途径,来发挥治疗治疗AIT的作用。4.白芍总苷能够减少AIT大鼠甲状腺组织中Fas、Fas L的表达,改善甲状腺细胞的凋亡。
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