【摘 要】
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目的:本实验研究As2O3诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡及对凋亡蛋白bcl-2/bax的影响;探讨As2O3对肝癌细胞株BEL-7402血管内皮生长因子表达的影响。 方法:以MTT法观察As2O3对肝
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目的:本实验研究As2O3诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡及对凋亡蛋白bcl-2/bax的影响;探讨As2O3对肝癌细胞株BEL-7402血管内皮生长因子表达的影响。 方法:以MTT法观察As2O3对肝癌细胞株BEL-7402生长的抑制;倒置显微镜下观察肝癌细胞生长情况;姬姆萨染色、吖啶橙染色观察不同浓度和作用时间下As2O3诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡的形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化;间标法流式细胞技术测定As2O3作用后肝癌细胞Bcl-2/bax的表达;免疫组化SABC染色法检测As2O3作用后肝癌细胞VEGF的表达。 结果:各浓度组As2O3（1-8μmol/L）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关;倒置显微镜下每日观察对照组和各实验组细胞形态的变化,发现随着浓度增高,肝癌细胞贴壁能力明显下降,细胞脱落呈漂浮生长状态,随作用时间延长,脱落细胞逐渐增多,至72h时有70%-80%的细胞呈悬浮生长。低浓度的As2O3（1～2 μmol/L）即对肝癌细胞株Bel-7402有明显的抑制作用,且可使肝癌细胞发生凋亡;在姬姆萨染色、吖啶橙染色观察凋亡细胞形态变化时,均可见到典型的凋亡细胞,晚期可见凋亡小体。流式细胞术细胞周期分析中,As2O3能将肝癌细胞阻滞于G2/M期,在G1峰前出现明显的凋亡峰:流式细胞术对bcl-2、bax两种基因编码蛋白的表达进行检测,经As2O3作用的人肝癌细胞株Bel-7402 bcl-2基因编码蛋白表达减少,bax基因编码蛋白表达增加。用SABC免疫组织化学方法检测肝癌细胞株BEL-7402 VEGF的表达情况。结果显示:癌细胞胞浆内呈棕黄色,提示肝癌细胞中VEGF表达强阳性。
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