【摘 要】
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目的:研究肺癌胸腔积液患者肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）中T细胞受体（TCR）Vβ亚家族的表达利用特点及经白细胞介素2（IL2）刺激后TIL细胞体外活性改变，为临床过继性免疫疗法应用提供实验依
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目的:研究肺癌胸腔积液患者肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）中T细胞受体（TCR）Vβ亚家族的表达利用特点及经白细胞介素2（IL2）刺激后TIL细胞体外活性改变，为临床过继性免疫疗法应用提供实验依据。方法:1．贴壁法分离肺癌胸腔积液患者TIL细胞及肿瘤细胞，用流式细胞仪检测TIL细胞TCRVβ亚家族的优势取用情况。2．IL2体外活化扩增TIL细胞，分别于3天、7天、14天、21天、28天、35天常规法计算增殖细胞数量，流式细胞仪检测CD4、CD8及CD56分子在TIL细胞表面表达情况，将TIL细胞与自体肿瘤细胞共培养24小时后，MTT法检测不时间段TIL细胞对肿瘤细胞的杀伤效果。结果:1．与健康人对照组外周血单个核细胞（PBMC）相比，45例肺癌合并胸腔积液患者TIL细胞均出现不同程度的TCRVβ亚家族优势取用情况，其中以TCRVβ5.2、Vβ5.3、Vβ8、Vβ9、Vβ13.1、Vβ14增高较为明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。2．TIL细胞经IL2刺激7天后开始出现体外扩增，平均28天到达扩增高峰，最高扩增倍数为190±50倍。分子表型表现为CD4+比例下降、CD8+、CD56+TIL细胞比例增高。肿瘤杀伤实验表明，经IL2活化后TIL细胞体外细胞毒性明显大于活化前，且与培养时间相关，在28天杀伤活性最强，杀伤率为70±10%，其差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:1．肺癌胸腔积液患者TIL细胞TCRVβ亚家族呈优势表达现象，CD4+、CD8+TIL细胞各自优势表达的TCRVβ亚家族不尽相同。2．肺癌胸腔积液分离TIL细胞经IL2体外刺激后增殖明显，其分子表型CD4+、CD8+、CD56+发生变化，对自身肿瘤细胞杀伤活性明显增加，可为临床应用过继性免疫治疗肺癌胸腔积液提供实验参考。
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