切应力抑制内皮细胞诱导的血管平滑肌细胞迁移及PI3K/Akt的调控作用

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhongming328
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血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的粘附、铺展和迁移是导致血管重建发生发展的关键环节。内皮细胞(endothelial cells, ECs)和VSMCs是构成血管壁的主要细胞成分,生理状态下,这两种细胞本身相互影响,同时又不断的受到血液动力学的作用。因此,研究VSMCs的生物学行为,应该考虑相关的力学因素及ECs和VSMCs的互相影响。本文首先应用ECs与VSMCs联合培养系统,通过细胞粘附和铺展实验,观测了ECs对VSMCs粘附、铺展的影响,同时应用免疫印迹法、半定量PCR及流式细胞仪技术检测了ECs对VSMCs整合素β1(β1-integrin)亚型的表达和分布影响;用免疫荧光法和免疫印迹法分别观测了VSMCs在粘附和铺展过程中,细胞骨架F-actin重组和粘着斑(focal adhesions, FAs)的聚集,以及蛋白激酶B(PKB/Akt)磷酸化改变。在此基础上,应用ECs与VSMCs联合培养的流动腔系统,对ECs面施加15 dynes/cm2切应力,以Transwell法检测细胞迁移能力,免疫
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