【摘 要】
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人胸腺素α1(human thymosin alpha 1,hTα1)是一种免疫增强剂,具有良好的临床疗效.用生物工程手段正确和高效表达hTα1,是降低hTα1的成本、提高使用普及率的重要方式之一.该文探索并实现了hTα1在毕赤酵母中的表达.挑选毕赤酵母偏爱密码子人工合成hαT1基因,并将其重组到核糖体蛋白(ribosom protein,RP)基因的5端获得重组基因hTα1-RP.将hTα1基因
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人胸腺素α1(human thymosin alpha 1,hTα1)是一种免疫增强剂,具有良好的临床疗效.用生物工程手段正确和高效表达hTα1,是降低hTα1的成本、提高使用普及率的重要方式之一.该文探索并实现了hTα1在毕赤酵母中的表达.挑选毕赤酵母偏爱密码子人工合成hαT1基因,并将其重组到核糖体蛋白(ribosom protein,RP)基因的5端获得重组基因hTα1-RP.将hTα1基因和hTα1-RP基因分别连接到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3.5K和分泌表达载体pPIC9K上.将四种重组质粒分别转化到组氨酸缺陷型毕赤酵母菌株GS115中,通过4mg/ml G418筛选出高拷贝整合菌株,从而获得胞内、胞外表达btα1、hTα1-RP的酵母工程菌株.甲醇诱导胞内融合表达型的转化菌株表达蛋白.经分离提纯、SDS-PAGE、Western blot鉴定分析,表达的为hTα1-RP融合蛋白,表达量可达25mg/L.
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