第一部分气相色谱-质谱法快速测定果汁和药品中吗啡啉方法的建立目的:采用衍生化法和气相色谱-质谱联用技术,建立一种快速测定果汁和药品中吗啡啉残留量的新方法。方法:吗啡啉在酸性条件下可与亚硝酸钠发生反应,生成稳定且具有一定挥发性的N-亚硝基吗啉衍生物。本实验优化了影响衍生化和萃取过程的条件,包括盐酸的浓度和用量、饱和亚硝酸钠的用量、衍生的温度和时间、萃取衍生物的试剂和时间。衍生物经二氯甲烷萃取后,采用气相色谱-质谱仪测定。结果:吗啡啉在25-500μg/L浓度范围内具有良好的线性关系,检出限为7.3μg/L,定量限为24.4μg/L,在苹果汁和布洛芬样品中的加标回收率为94.3%-109.0%,日内精密度为2.0%-4.4%,日间精密度为3.3%-7.0%,该方法准确度和精密度良好。结论:此方法简便、快速、灵敏度高、所用衍生试剂价格低廉,已成功应用于苹果汁和布洛芬药物中吗啡啉残留量的测定。第二部分基于液质联用技术的万古霉素体外代谢和在模拟水环境中降解的研究目的:本研究旨在研究万古霉素的体外代谢及其在模拟水环境中的降解规律,并推测相关代谢产物或降解产物的化学结构。方法:本实验建立了万古霉素在大鼠活性肝微粒体体外孵育液(实验组),大鼠灭活肝微粒体体外孵育液(对照组),磷酸盐缓冲液(PBS组)和纯水(纯水组)中的四种孵育体系,以及未添加万古霉素的大鼠活性肝微粒体体外孵育体系(空白组),在37℃恒温振荡器中连续孵育十天,每日取样。采用高分辨率、高灵敏度的超高效液相色谱-三重四极杆-飞行时间质谱技术(UHPLC-Triple-TOF-MS),在正离子模式下,研究万古霉素体外代谢及其在模拟水环境中的降解规律。应用MetabolitePilot 2.0代谢物鉴定软件筛选可能的降解产物。结果:万古霉素在四种孵育体系中均发生降解,其在大鼠活性肝微粒体体外孵育体系与大鼠灭活肝微粒体体外孵育体系中的降解规律一致,表明大鼠肝微粒体中的细胞色素P450酶系对万古霉素的代谢活力不高。在四种孵育体系中,筛选出四个可能降解产物,总结了它们的生成规律。随后,推测出了它们可能的化学结构,阐明了万古霉素的降解途径。结论:研究结果可为今后研究万古霉素及其代谢产物或降解产物对生态环境和人类健康的影响提供理论基础。第三部分基于液质联用技术的非靶向和拟靶向代谢组学结合的方法鉴别正常宰杀猪肉和死后宰杀猪肉目的:为了保证猪肉的质量和安全性,采用非靶向和拟靶向代谢组学相结合的方法,识别可靠、稳定的差异性生物标志物,用于鉴别正常宰杀猪肉和死后宰杀猪肉。方法:首先,采用基于超高效液相色谱-三重四极杆-飞行时间质谱(UHPLC-Triple-TOF-MS)的非靶向代谢组学方法检测所有代谢产物,应用XCMSplus软件处理原始数据,提取并统计分析所有的特征离子。随后,根据筛选原则筛选差异性代谢产物,依据其母离子和碎片离子质谱信息,构建离子对,建立拟靶向代谢组学方法。然后,采用基于超高效液相色谱-四极杆线性离子阱质谱(UHPLC-QTRAP-MS)的拟靶向代谢组学方法准确测定筛选出的差异性代谢产物。最后,应用MarkerView软件进行统计分析,剔除其中的假阳性差异性代谢产物,确定并鉴定差异性生物标志物。结果:本研究采用基于UHPLC-Triple-TOF-MS的非靶向代谢组学方法,筛选出24个差异性代谢产物。基于此,采用UHPLC-QTRAP-MS的拟靶向代谢组学方法,确定14个差异性生物标志物。经METLIN数据库和相关参考文献匹配,差异性生物标志物中鉴别出肌肽、左旋肉碱、L-组氨酸、N-乙酰组氨酸、乙酰胆碱、L-乙酰肉碱和两个磷脂酰胆碱。β-丙氨酸代谢通路和组氨酸代谢通路可能是死后宰杀猪肉和正常宰杀猪肉之间主要的差异性代谢通路。结论:本研究采用非靶向和拟靶向代谢组学结合的方法,识别出可靠、稳定的差异性生物标记物,可用于鉴别正常宰杀猪肉和死后宰杀猪肉。