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目的:通过体外实验,研究断藤益母汤对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血树突状细胞(dendriticcell,DC)迁移功能相关的趋化因子和受体表达的影响,从DC迁移功能的角度来探讨断藤益母汤的免疫抑制和治疗RA的机制。方法:密度梯度离心法分离RA患者外周血单个核细胞(PBMCs),采用贴壁法分离出单核细胞,并以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白介素-4(IL-4)刺激7天以使单核细胞分化成树突状细胞,分别加入甲氨蝶呤(阳性对照)、断藤益母汤冻干粉(试验组)进行干预,随后以酶联免疫吸附测定(ELISA)测定上清液中细胞因子CXCL9和CXCL10的含量,并收集细胞,利用流式细胞技术检测DC表面CCR5和CCR7的表达水平,并与空白组进行对比。结果:1.在GM-CSF和IL-4的共同刺激下,外周血单核细胞成功分化成为DC,在光镜下可观察到DC的典型树突状形态。2.根据CCK8的细胞毒理-增殖实验结果,比较相同时间点下,不同断藤益母汤浓度组与正常组的A值,得出断藤益母汤冻干粉的最佳给药质量体积比为l00mg/ml。3.经ELISA法检测后,结果显示,与空白组对比,经断藤益母汤冻干粉及甲氨蝶呤干预后DC培养的上清液中CXCL9、CXCL10浓度均明显下降(P<0.05),差异具有统计学意义;而断藤益母汤冻干粉干预组与甲氨蝶呤组对比,CXCL9、CXCL10浓度下降不明显(P>0.05),差异没有统计学意义。4.流式细胞结果显示,经断藤益母汤冻干粉及甲氨蝶呤干预后的DC表面CCR5和CCR7的表达均明显下调(P<0.05),差异具有统计学意义;而断藤益母汤冻干粉干预组与甲氨蝶呤组对比,CCR5和CCR7的表达略有下调(P>0.05),但差异没有统计学意义。结论:断藤益母汤可以下调RA患者外周血DC表面CCR5和CCR7的表达,减少趋化因子CXCL9和CXCL10的分泌,从而通过抑制DC往次级淋巴器官的迁移,减少其与T细胞的特异性结合,从而起到治疗RA的作用。