非小细胞肺癌外周血EGFR基因二代测序检测敏感性及影响因素分析

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目的:在第二代测序技术基础上,探讨NSCLC外周血EGFR基因检测的可行性和敏感性,并进一步分析影响其检测敏感性的相关因素。方法:收集2015年1月-2017年5月于苏大一附院病理确诊的NSCLC患者的肿瘤组织标本,并同时留取外周血标本。通过Illumina Hi Seq 2000高通量测序平台(为第二代测序技术)对两组样本进行EGFR基因检测。1.收集患者一般临床资料,比较外周血和肿瘤组织EGFR基因突变情况,通过公式计算外周血检测结果的敏感性和一致性,卡方检验分析EGFR基因突变与临床特征的关系。2.以肿瘤组织检测结果为金标准,卡方检验进一步分析患者的性别、年龄、吸烟史、病理类型、临床分期、病理分化程度、肺癌化疗史、肿瘤组织EGFR基因突变丰度等临床资料对其外周血EGFR基因检测敏感性的影响;并通过多因素Logistc回归进一步分析其独立影响因素;同时通过ROC曲线分析肿瘤组织EGFR基因突变丰度对外周血EGFR基因检测的指导价值。结果:1.本研究共收集到187例配对的标本,通过外周血与肿瘤组织EGFR基因突变情况比较后发现,外周血检测特异性达99.1%,且两组同时检出突变的44例中EGFR突变位点基本一致,因此外周血检测结果是可靠的。2.公式计算得出,外周血检测敏感性为62.0%,特异性为99.1%,两组一致率85.0%;外周血做为检测标本是可行的。通过Mc Nemar检验显示肿瘤组织突变检出率明显高于外周血,做为检测标本,外周血逊色于肿瘤组织。通过Kappa检验两组的一致性,显示EGFR基因突变状态在肿瘤组织与外周血中一致性一般。3.以肿瘤组织检测结果为金标准,发现患者的临床特征中性别、吸烟史和肿瘤病理类型与EGFR基因突变有一定的相关性,即女性、非吸烟和腺癌患者是行EGFR基因检测的优势人群。4.临床分期中的N分期和M分期、病理分化程度、肺癌化疗史、肿瘤组织基因突变丰度对外周血EGFR基因检测敏感性影响较大,而性别、年龄、吸烟史、病理类型和临床分期中的T分期对其检测的敏感性无明显影响;其中临床分期、病理分化程度、肺癌化疗史和肿瘤组织基因突变丰度均为其独立影响因素。且ROC曲线分析得出肿瘤组织EGFR基因突变丰度>24%时,外周血检测敏感性明显增高。结论:外周血EGFR基因检测结果是可靠的,且具有较高的敏感性和相当高特异性,使其具有一定临床指导价值,是组织学基因检测的有效补充;对因各种原因不能获取组织学标本的患者,外周血可取代组织学标本进行基因检测。女性、非吸烟和腺癌患者是行EGFR基因检测的优势人群。对于晚期、低分化、无肺癌化疗史、肿瘤组织EGFR基因突变丰度>24%的NSCLC患者进行外周血EGFR基因检测可获得更高的敏感性。
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