亚硒酸钠诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡及其机制的探讨

来源 :温州医学院 温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fsswczc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:采用不同浓度的亚硒酸钠(Sodium Selenite,Na2SeO3,SSE)作用于人胰腺癌细胞PANC-1,从细胞形态结构、抑制率及凋亡率来研究SSE对人胰腺癌细胞PANC-1的凋亡诱导作用,并通过检测不同浓度SSE作用PANC-1细胞后细胞内活性氧、线粒体膜电位、细胞色素C及Caspase3的变化,探讨SSE诱导PANC-1细胞凋亡与细胞内活性氧、线粒体膜电位、细胞色素C及Caspase的关系,以及在亚SSE诱导PANC-1细胞机制中的作用。  方法:通过显微镜观察SSE作用后PANC-1细胞的形态学改变;MTT比色法检测SSE对PANC-1细胞增殖的抑制作用;DNA ladder提取电泳观察细胞凋亡DNA的变化;用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,并检测细胞内活性氧(ROS)水平及线粒体膜电位下降比率,酶联免疫吸附法(ELISA)法定量检测Caspase3凋亡相关蛋白,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内及线粒体内细胞色素C(Cyt C)蛋白的表达,荧光定量PCR法检测基因cytC的表达  结果:SSE显著抑制人胰腺癌细胞PANC-1生长,并且具有浓度时间依赖性,并随着SSE浓度的增加和作用时间的延长,PANC-1细胞凋亡,坏死率逐渐增加;DNA ladder电泳呈明显的梯带状,并伴有拖尾,提示亦伴有大量坏死;MTT比色法显示随着SSE浓度增加和作用时间的延长,对PANC-1细胞的增殖抑制作用亦逐渐增强;Annexin V-FITC/PI检测发现PANC-1细胞的凋亡率随着SSE浓度增加而逐渐增多;荧光显微镜及流式细胞术观察细胞内活性氧(ROS)水平随着SSE浓度增加而逐渐增加;ELISA定量检测Caspase3含量与SSE水平呈正相关,随着SSE浓度的增加Western Blot及RT-PCR检测示,细胞内Cyt C含量无明显变化。  结论:(1)SSE具有抑制胰腺癌细胞增殖的作用,并具有浓度时间依赖性。(2)SSE具有诱导胰腺癌细胞PANC-1凋亡的作用,并具有浓度依赖性。(3)SSE诱导人胰腺癌细胞凋亡的机制可能与产生活性氧(ROS)、降低线粒体膜电位、激活Caspase系统及促使细胞色素C从线粒体的释放有关。
其他文献
长沟沿大队去年种植杂交稻“早丰A×C64”850亩,占水稻面积的30%,平均亩产955斤。比当地主栽品种“京引177”增产12~18%。其中450亩,亩产千斤以上。农科组种植的85亩,亩产达1
洋芋是曲靖地区一项重要粮食作物,每年种植的小春、大春和晚秋三季洋芋约一百一十万亩。洋芋生产的好坏,对当年增产具有举足轻重的地位,尤其是对于提高山区群众生活水平和解
新疆棉花枯萎病,在一九六三年调查时,只在莎车细绒棉试验站的二亩多地中发现病株。由于执行检疫制度不严,种子乱引乱调,带病棉籽到处扩散,据不完全调查,现已在喀什地区和吐
读周作人先生的《苦竹杂记》,常常沉醉于“开卷有益,掩卷有味”的佳境中.而其中趣味,恐怕也唯有阅读方能觅得.rn周作人先生是很看重“趣味”的人,他认为这是美也是善.在《笠
目的:  通过多体素氢质子磁共振频谱(1H MRS)对不同糖化血红蛋白(HbAlc)水平的2型糖尿病患者脑部代谢物浓度相对定量检测,了解不同血糖控制水平糖尿病患者脑部代谢物浓度的变化,探
我们设计了一个用微机对地膜吹塑机进行控制的实时系统,该系统对地膜的厚度及加工温度进行控制,要求厚度控制误差小于2μm,温度控制误差小于±5℃。该系统的中心机(Z80CPU)
【背景和目的】  甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)是一种重要的改变病情抗风湿药(disease modifying anti-rheumatic drug,DMARD),用于治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)和强直
目的:观察银杏叶提取物对慢性氟中毒大鼠认知功能障碍是否有保护作用。  方法:实验动物分为3组,对照组、氟中毒组(NaF)和银杏叶提取物(EGb)治疗组(NaF+EGb),自由饮用自来水(NaF
本文介绍噪声剂量计的有关概念,重点介绍HY106型噪声剂量计的结构、工作原理和优越性。 This article describes the concept of noise dosimeter, focusing on the HY106-t
一、春播草木樨混种油菜 1977年义县九道岭公社星星屯大队种草木樨400亩,其中有250亩混种油菜,共收油菜籽2,000多斤。1978年种草木樨450亩,有300亩混种 First, the spring